论文部分内容阅读
世界疼痛研究联合会将神经病理性疼痛定义为外周或中枢神经系统的感觉通路遭受损伤或者功能障碍而引起的疼痛。外周神经损伤因导致感觉神经元轴突退行性变化、胞体内基因表达的改变、神经元的死亡和神经元的再生等一系列变化而引起神经病理性疼痛发病。由于对神经病理性疼痛发病机制了解甚少,目前对这种临床慢性疼痛难以进行有效治疗。本课题利用从人类蛋白质图谱计划获得的797种抗体通过免疫组化和Western Blot对axotomy损伤1周后Sprague Dawley大鼠DRG内发生差异表达的蛋白质进行筛选;利用基于激光扫描共聚焦显微镜体视学技术对axotomy损伤1周和1个月的成年Bax KO和野生型小鼠L5 DRG进行神经元数目统计计数;以纯合子Ⅱ型糖尿病转基因鼠(BKS.Cg-m +/+ Leprdb/J, Leprdb)和杂合子对照小鼠(BKS.Cg-m +/+ Leprdb/J, mLeprdb100)为实验动物,利用体视学方法来检测高血糖对DRG感觉神经元数目的影响以及axotomy损伤对II型糖尿病转基因鼠DRG神经元数目的影响。实验结果表明ATF3,CECR5,LYN,UPF3B这四种蛋白质在axotomy损伤1周后SD大鼠损伤侧DRG中表达上调,而SCGN表达下降,尽管FRMD6,LRPAP1,NDUFS4,RAP1GAP这四种蛋白的免疫组化结果下调,但是Western Blot的结果显示它们的下降程度并不明显。Bax参与了axotomy损伤诱导的早期DRG神经元的死亡,随着损伤时间的延长,Bax介导的信号通路逐渐被其他细胞死亡途径所替代,DRG内的大型、中型和小型神经元对axotomy损伤诱导的神经元死亡并没有特殊的敏感性。长期高血糖可以导致II糖尿病转基因小鼠L5 DRG神经元的数目下降30%左右,并且主要集中在中型神经元,而axotomy损伤1周并没有增加神经元的死亡。了解外周神经损伤对DRG神经元内蛋白表达的改变和DRG神经元死亡的机制有助于加快对神经病理性疼痛发病机制的认识,从而为有效治疗神经病理性疼痛提供合适的作用靶点。