天然免疫和适应性免疫共同组成一了动物的免疫系统。天然免疫是机体防御病原微生物感染的第一道防线,在天然免疫系统中最重要的一环就是模式识别受体PRRs对病原微生物模式相关分子PAMPs的识别。TLR是重要的胞外和胞内受体,参与到NF-κB和IRF激活的信号通路,引起机体的炎症反应和抗病毒反应。天然免疫和适应性免疫不是独立的两个系统,相反,天然免疫的重要分子和信号通路可以激活适应性免疫。在这个机制中,TLRs信号通路是联系天然免疫与适应性免疫的纽带。斑马鱼与人类一样具有天然免疫和适应性免疫。对斑马鱼适应性免疫系统的研究已有多年,取得了重要的研究成果,研究技术也有很大的提高。然而,对斑马鱼天然免疫系统的研究才刚刚起步。天然免疫系统是机体防御病原微生物感染的第一道防线,而且对适应性免疫系统的激活有重要的影响。因此在斑马鱼中深入研究天然免疫系统不仅可以促进我们对斑马鱼自身的免疫系统的认识,而且从进化的角度看,也为研究高等脊椎动物免疫系统提供思路和工具。并且斑马鱼因其个体小、易于饲养、性成熟周期短、易繁殖和繁殖率高、胚胎透明易观察、便于胚胎操作等优势,现已广泛应用于基因功能的相关研究。本研究以斑马鱼为动物模型,采用显微注射的方式将外源的p204质粒导入斑马鱼受精卵中,通过观察报告基因GFP的荧光表达,发现p204在斑马鱼胚胎中从8hp研始表达,表达位置主要集中载斑马鱼的胸腹部,在8hpf-8dpf时期p204大量表达,8dpf后p204的表达量会逐渐减少,直至11dpf右发现荧光完全消失。p204-EGFP质粒注射后导致斑马鱼表型变化,产生畸形,出现腹部变大、尾部弯曲等状况。对注射后的斑马鱼胚胎,选取其中表达绿色荧光的胚胎进行实时定量PCR检测,检测先天免疫相关的基因tbk1和sting,通过实时定量检测,发现p204注射后能够引起相应的先天免疫相关基因tbkl和sting表达量在8hpf-48hpf阶段比对照组都有明显上调,而之前4hp阶段段的表达量并没有明显变化。另外进行了相应基因的原位杂交检测,其结果与实时定量结果相吻合。为了能够获得p204整合进入斑马鱼基因组中的突变体,我们利用tol2转座子携带p204,构建tol2-p204的载体,并将其和TP转座酶一起共注射到斑马鱼受精卵中。研究结果表明：1外源p204基因可以在一定程度上影响斑马鱼的发育,造成斑马鱼的畸形；2.p204能够影响斑马鱼先天免疫,参与相关信号通路；3.tol2-p204载体构建成功,并且导入斑马鱼受精卵中,但p204在斑马鱼体内的表达不够稳定。本研究为进一步以斑马鱼为模式动物研究先天免疫相关分子机制和掰马鱼与哺乳动物先天免疫信号途径的进化关系提供了新的依据。