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目的:观测敌百虫(Dipterex)加速高脂模型兔动脉粥样硬化形成的作用并初步探讨其作用机制。 方法: (1)动物实验:健康新西兰兔40只,普通饲料适应性喂养2周后随机分为2组,①高胆固醇高脂(HCHL)组:单纯喂饲HCHL饲料(普通草粉饲料加入1％胆固醇,5%猪油);②高胆固醇高脂加Dipterex(HCHL+D)组:喂饲HCHL饲料加Dipterex清晨空腹灌胃(18mg·kg-1·d-1)。在喂饲HCHL饲料前和实验第5、10、15周分别于耳缘静脉采血,检测兔血清对氧磷酶(PON1)、胆碱酯酶(ChE)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、C反应蛋白(CRP)和血糖(Glu);实验前,第5周、第10周每组分别处死5只兔,第15周处死全部剩余兔,取主动脉全段,苏丹Ⅳ染色,1mm2透明方格纸法测定粥样斑块面积占内膜面积的百分比;检测肝PON1活性及血管内皮依赖性舒张功能。 (2)细胞实验:将人脐静脉内皮细胞(HUVEC-12)与含不同浓度Dipterex的DMEM培养基培养24 h后,MTT比色法检测细胞的活性并计算Dipterex抑制HUVEC-12的IC50;以IC50的Dipterex处理细胞不同时间后(0 h,4 h,6 h,8 h,12 h,24 h,48 h),观察Dipterex诱导HUVEC-12损伤的时量关系;Wesern Blot法测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白表达;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)浓度。 结果: (1)喂饲HCHL后,二组动物的TC、TG、HDL、LDL、CRP、Glu水平均明显增高,二组检测值差异无显著意义(p>0.05);血清PON1、肝PON1活性降低,HCHL+D组PON1活性低于HCHL组(p<0.05);二组动物主动脉EDRR均降低,HCHL+D组EDRR降低大于 HCHL组(p<0.05);二组动物主动脉均见粥样硬化斑块形成,但 HCHL+D组动脉粥样斑块面积/内膜面积百分比明显高于HCHL组(p<0.05)。 (2)经不同浓度Dipterex(0μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、800μmol/L)处理HUVEC-1224 h后,MTT测定结果显示:随着加入 Dipterex浓度的增加,细胞活性明显下降,IC50约为410μmol/L。以410μmol/L Dipterex处理细胞不同时间(0 h,4 h,6 h,8 h,12 h,24 h,48 h),随着Dipterex作用时间的延长,对细胞的抑制作用呈时间依赖性增加,同时促进内皮细胞上清液MDA的产生;抑制eNOS的表达。 结论:高脂模型动物长期口服低剂量 Dipterex,消耗机体 PON1,降低血管内皮依赖性舒张功能;Dipterex与内皮细胞孵育,通过氧化应激抑制 eNOS的表达,诱导HUVEC-12损伤,加速动脉粥样硬化形成。