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本文利用液相化学法制备了HAP/IDA-Ni2+、Fe3O4/HAP-Ni2+、Ni(OH)2/HAP及Ni(OH)2/HAP-RBH纳米微粒,并用多种方法对合成微粒进行表征。利用Ni2+与组氨酸标签(His-tagged)蛋白质之间的亲和作用,将这些纳米微粒作为吸附剂实现了对His-tagged蛋白质的分离与纯化,并对其亲和分离行为进行了研究。具体研究内容和结论如下:(1)HAP/IDA纳米微粒的制备及分离纯化His-tagged蛋白质采用水热法在SBF溶液中成功制备了多孔的HAP纳米微粒,平均粒径在40 nm左右。利用HAP纳米微粒表面的活性羟基,成功实现了其表面IDA功能化,进一步螯合Ni2+后,得到HAP/IDA-Ni2+纳米微粒。这种纳米微粒能够从蛋白混合液中一步纯化His-tagged蛋白质。结果表明,HAP/IDA-Ni2+纳米微粒表现出高的特异性和吸附能力,重复利用四次后,材料依然保持较高的分离性能。HAP/IDA-Ni2+纳米微粒适用于分离低分子量His-tagged蛋白质。(2)Fe3O4/HAP纳米微粒的制备及分离纯化His-tagged蛋白质采用水热法成功制备了具有磁响应性能的Fe3O4/HAP纳米微粒。进一步螯合Ni2+后,Fe3O4/HAP-Ni2+纳米微粒在外加磁场条件下可以直接从蛋白混合液中纯化His-tagged蛋白质。结果表明,该纳米微粒对His-tagged蛋白质具有高的选择性和相对弱的非特异性吸附,其最大吸附量为12.98 mmol/g。(3)Ni(OH)2/HAP纳米微粒的制备及分离纯化His-tagged蛋白质采用水热法成功制备了Ni(OH)2/HAP纳米微粒,并考察了反应条件和Ni2+浓度对Ni(OH)2/HAP粒径和形貌的影响,Ni2+浓度越低,所得纳米微粒的粒径则越小。这种纳米微粒可以直接用于纯化His-tagged蛋白质,并采用三种His-tagged蛋白质对其亲和特性进行了评价。结果表明,Ni(OH)2/HAP纳米微粒对His-tagged蛋白质具有很高的亲和分离特性和对His-tag的普适性。(4)Ni(OH)2/HAP-RBH纳米微粒的制备及分离纯化His-tagged蛋白质采用三步法成功制备了多功能Ni(OH)2/HAP-RBH纳米微粒。首先在柠檬酸存在下,水热法合成Ni(OH)2/HAP纳米微粒。其次罗丹明B与水合肼回流12 h合成罗丹明酰肼(RBH)。最后RBH与微粒表面羧基反应形成Ni(OH)2/HAP-RBH纳米微粒。作为亲和吸附剂,该粒子可以用于直接净化His-tagged蛋白质,并表现出极好的蛋白质吸附能力,最高吸附量为115 mg/g。Ni(OH)2/HAP-RBH纳米微粒对Pt2+表现出良好的荧光增强效应、灵敏性和选择性,检出限为3.0×10-8 mol/L,可作为Pt2+探针用于荧光成像。