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目的：结直肠癌(colorectal cancer, CRC,大肠癌)是世界上发病率和死亡率均排第3位的恶性肿瘤性疾病，在我国恶性肿瘤性疾病中发病率排第3位，死亡率第5位，严重威胁着人类健康。然而，其发病机制尚不明确。近年来抑癌基因异常甲基化成为结直肠癌的研究热点。抑癌基因异常甲基化可以导致肿瘤抑癌基因失活，就不能正常转录、翻译合成抑癌蛋白，不能发挥抑癌作用，细胞就有可能发生单克隆增生形成肿瘤。抑癌基因甲基化参与了肿瘤发生、发展全过程。多项研究提示CHD5基因(染色质解旋酶DNA结合蛋白5)是结直肠癌的抑癌基因，具有调控细胞增殖、凋亡和衰老的功能，为肿瘤抑制调控系统的总开关。近些年国外学者发现CHD5基因异常甲基化导致表达下调或沉默与多种恶性肿瘤相关，包括结直肠癌。国内仅有学者研究发现CHD5基因表达降低或缺失与结直肠癌有关，但国内对于CHD5基因甲基化与结直肠癌的关系并无报道。本研究旨在探讨抑癌基因CHD5基因甲基化与结直肠癌发生发展及临床病理特征的关系。方法：选取2013年3月~8月河北医科大学第二医院和河北医科大学第四医院40例结直肠癌患者手术标本，采集癌组织（经病理确诊）、相应癌旁组织（距离癌组织至少大于5cm，经病理证实无肿瘤浸润)和正常黏膜组织（手术切缘上皮，经病理证实无肿瘤浸润）以及40例河北医科大学第二医院内镜下切除的结直肠腺瘤组织（经病理确诊）。采用MSP方法(甲基化特异性PCR)检测以上组织中CHD5基因甲基化情况；分析CHD5基因甲基化与结直肠癌临床病理特征（例如年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分级分期等）的关系、CHD5基因甲基化与结直肠腺瘤临床病理特征（例如年龄、性别、腺瘤大小、腺瘤数量、腺瘤病理类型等）的关系；采用RT-PCR方法(实时定量逆转录PCR)检测CHD5在结直肠癌组织、腺瘤组织、癌旁组织、正常黏膜组织中mRNA表达情况及Western-blot检测CHD5蛋白在这些组织中的表达情况，并分析癌组织CHD5mRNA与蛋白之间表达的相关性以及癌组织CHD5甲基化与蛋白表达的关系。结果：1各组织CHD5甲基化情况1.1在40例正常黏膜组织、癌旁组织、腺瘤组织、结直肠癌组织中表达率分别为12.5%（5/40）、22.5%（9/40）、47.5%（19/40）、72.5%（33/40）。CHD5在癌组织中甲基化阳性率显著高于正常、癌旁、腺瘤组织（X2=29.463,X2=20.050,X2=5.208,P值均<0.05）；腺瘤组织CHD5甲基化阳性率显著高于正常及癌旁组织（X2=11.667,X2=5.495,P值均<0.05）；正常与癌旁组织之间甲基化差异无统计学意义（X2=1.385,P>0.05）。1.2CHD5基因甲基化与直肠癌分化程度、分期、淋巴转移及远处转移密切相关（X2=4.742,X2=4.409,X2=5.230,X2=7.905,P值均<0.05），而与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤大小、肿瘤病理类型等临床病理特征没有明显的相关性（P值均>0.05）。1.3CHD5基因甲基化状态与结直肠腺瘤病理类型相关（X2=9.256,P<0.05），绒毛状腺瘤甲基化率（75.0%）高于管状（33.3%）、管状绒毛状（33.3%）、锯齿状（0%）腺瘤组织。CHD5甲基化状态与腺瘤患者的性别、年龄、腺瘤部位、腺瘤大小、腺瘤数量等临床病理参数没有明显相关性(P值均>0.05)。2各组织CHD5mRNA表达40例正常组织、癌旁组织、腺瘤及癌组织中CHD5mRNA表达分别为：0.225±0.276，0.169±0.231，0.147±0.159，0.013±0.011；单因素方差分析SNK检验，CHD5mRNA表达在正常、癌旁、腺瘤、癌组织之间存在差别（P<0.05），并且呈下降趋势。3各组织中CHD5蛋白表达40例正常组织、癌旁组织、腺瘤及癌组织中CHD5蛋白表达分别为：0.438±0.205，0.398±0.180，0.156±0.100，0.024±0.311；单因素方差分析SNK检验：正常、腺瘤、癌组织之间CHD5蛋白表达存在差别（P<0.05），并且呈下降趋势。4CHD5mRNA与蛋白表达关系对40例结直肠癌组织CHD5mRNA及蛋白表达Pearson相关性分析，结果示两者存在正相关，有统计学意义（r=0.899，P<0.05）。CHD5基因mRNA的表达降低或缺失常伴随着CHD5蛋白的表达降低或缺失。5癌组织CHD5蛋白表达与CHD5甲基化关系定性检测40例癌组织CHD5甲基化和CHD5蛋白表达情况，分析两者关系。CHD5蛋白失表达的23例中,其CHD5甲基化率为87.0%(20/23)，CHD5蛋白表达的17例中，其CHD5甲基化率为52.9%(9/17)。卡方检验结果示：甲基化率差异有显著性(X2=5.673，P<0.05)，即CHD5蛋白表达阴性的甲基化率明显高于蛋白表达阳性的标本。结论：1CHD5基因甲基化率在结直肠癌演进过程中是逐步增高的，CHD5基因甲基化与结直肠癌发生发展有关；CHD5甲基化率在癌组织明显高于腺瘤、癌旁、正常组织，而腺瘤高于正常和癌旁组织，CHD5甲基化可能参与了大肠腺瘤-腺癌的演变过程。2结直肠癌中CHD5甲基化率高，同时伴随mRNA、蛋白表达的降低；CHD5mRNA与蛋白表达正相关；CHD5基因甲基化与蛋白失表达相关。实验提示我们CHD5基因可因发生甲基化导致表达缺失，引起结直肠癌的发生发展。3CHD5甲基化状态与结直肠癌临床病理特征密切相关，肿瘤低分化、发生淋巴结转移、发生远处转移及恶性分期者，甲基化率高。