厌氧固态法发酵猪血蛋白的研究

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以发酵后氨基酸浓度为评价指标,分别对麦麸添加量、发酵温度、发酵剂添加量、血渣湿度和发酵时间进行单因素考察以确定两种市售发酵剂厌氧固态发酵猪血的最佳工艺条件。结果表明:发酵温度为37.5℃时,发酵后物料中氨基酸的含量达到最大值,为使物料中蛋白降解充分,应尽量减少物料中有毒物质的积累,发酵的最佳时间为7天。活力99添加量,麦麸添加量和血渣湿度对试验结果影响很大,在此基础上,采用Box-Behnker响应面设计法,筛选出厌氧固态发酵猪血的最佳工艺条件:血渣湿度76.0%,麦麸添加量10.8g,玉米粉添加量1.2g,活力99添加量0.768g,粗蛋白降解剂添加量0.192g,血渣加入量86.0g,发酵时间7天,发酵温度37.5±0.5℃。在此条件下,发酵后物料中氨基酸含量为22.9mg g-1,与发酵前相比氨基酸含量提高了15倍,与理论值23.8mg g-1偏差小于5%,模型选用合理有效。以发酵后底物的色、香作为发酵效果初步评价指标,结果表明:底物呈黑褐色并伴有浓郁的醇香味,发酵效果较为理想。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),确认猪血渣中的蛋白被降解成小肽。为了评定发酵血粉作为饲料添加剂效果,采用胃蛋白酶体外模拟实验,分别对发酵血粉和未发酵血粉进行蛋白消化率测定。结果显示:酶解20小时后,发酵血粉蛋白消化率达到96.3%,与未发酵血粉相比提高了近40%;酶解4小时后,发酵血粉酶解液中各类氨基酸含量均有提高;将发酵血粉按一定比例掺于三周龄幼小鼠日粮中,饲养两周后经小肠组织切片实验未发现异常病变。分别以发酵血粉和未发酵血粉(对照组)作为血粉盐酸水解提取L-组氨酸的原料,用单因素试验分别考察水解时间,盐酸浓度和浓盐酸添加量对水解效果的影响。在单因素考察中,与对照组相比,在相同条件下发酵血粉水解液中L-组氨酸含量均高于对照组,并得到发酵血粉的最佳水解时间为20h,浓盐酸跟底物比例为3:1(mL g-1),盐酸浓度为9mol L-1。未发酵血粉中含有未被微生物降解的淀粉,其在低料液比条件下易糊化,所以没有对对照组进行浓盐酸添加量考察。
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