【摘 要】
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绿藻裂片石莼含有丰富的营养物质及矿物元素,其中所含多糖具有广泛的生物活性。本文系统性的研究了裂片石莼多糖的提取、多糖分子的脱硫修饰、脱硫前后多糖的抗氧化抗肿瘤活
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绿藻裂片石莼含有丰富的营养物质及矿物元素,其中所含多糖具有广泛的生物活性。本文系统性的研究了裂片石莼多糖的提取、多糖分子的脱硫修饰、脱硫前后多糖的抗氧化抗肿瘤活性研究,并对多糖进行了分离纯化和初步结构的研究。利用微波辅助提取裂片石莼多糖,采用响应面法优化多糖提取工艺并确定多糖的最佳提取参数:微波功率400W、提取时间8min、液料比25mL/g,在此条件下裂片石莼多糖提取率可达到16.37%。利用超滤技术将多糖分成三个不同分子量组分:UFP1(Mw<10kDa)、UFP2(10kDa100kDa)。采用溶剂离解法对不同分子量组分多糖进行了脱硫修饰,并对比了脱硫前后多糖的理化性质。结果表明裂片石莼多糖是一种含糖醛酸的硫酸杂多糖。脱硫后多糖中硫酸根含量明显下降,硫酸根脱除率在55%以上,UFP2、UFP3和脱硫多糖DS-UFP2、DS-UFP3的主要成分为多糖,UFP1和DS-UFP1的多糖含量较低。糖醛酸含量在不同组分多糖中的差异很大。对比脱硫前后多糖红外光谱表明脱硫后,多糖主链完整,硫酸基团吸收减弱或消失。对比了脱硫修饰前后不同分子量多糖组分的抗氧化、抑制人肠癌细胞DLD-1活性。结果表明:所有多糖组分都具有一定的抗氧化和抑制DLD-1肠癌细胞的活性,并且存在一定的量效关系。硫酸根含量高、分子量大小和糖醛酸含量都处于中间值的UFP2组分,在不同的评估指标下,被检测到良好的抗氧化效果。然而UFP2在抑制DLD-1肠癌细胞能力表现较弱。硫酸根含量最低但糖醛酸含量最高的高分子多糖组分DS-UFP3具有最好的抑制DLD-1肠癌细胞活性。采用 DEAE-Sepharose Fast Flow 离子层析系统和 Sephacryl S-300凝胶层析系统对UFP3进行了纯化,得到纯化多糖UFP3-21,液相显示单峰说明是纯品多糖,分子量为303.626kDa。红外光谱表明UFP3-21具有多糖的基本特征峰;乙酰化分析表明UFP3-21的单糖组成为:鼠李糖、木糖、葡萄糖,摩尔比为1.00:0.16:0.09。25℃的1HNMR谱化学位移表明6-脱氧糖存在于UPF3-21中,与单糖组成含鼠李糖结果相一致。60℃的1HNMR谱信号分析UPF3-21中可能主要含有三个残基。13C NMR谱上δ 82-88处无共振信号,说明糖残基为吡喃型糖苷。DEPT-45谱中δ 19.5处负峰可能由于鼠李糖的C6与其它基团相连而使其只有两个质子。
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