【摘 要】
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A型产气荚膜梭菌是鸡肠道内正常菌群之一。为了调查NetB基因在四川地区产气荚膜梭菌中的检出率,对75株鸡源产气荚膜梭菌做了PCR检测。然后检测试验菌株胶原蛋白酶活力和种内
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A型产气荚膜梭菌是鸡肠道内正常菌群之一。为了调查NetB基因在四川地区产气荚膜梭菌中的检出率,对75株鸡源产气荚膜梭菌做了PCR检测。然后检测试验菌株胶原蛋白酶活力和种内拮抗性能两项致病因子,进一步筛选出用于动物试验用菌株。通过三次动物试验筛选最佳试验菌株和攻毒剂量,并检测在最佳条件下菌株对回肠绒毛长度、组织病理学变化、回肠菌群结构的影响。1.鸡源产气荚膜梭菌的分离鉴定从四川省成都、雅安等地区的规模化鸡场采集具有肠炎或腹泻症状的鸡小肠内容物和新鲜粪样共93份,通过紫牛乳培养基富集培养后接种1%葡萄糖血琼脂平板、CW平板、TSC平板三种鉴别培养基分离鉴定得到19株产气荚膜梭菌,分离率为20.4%。2.产气荚膜梭菌致病因子的检测根据文献报道的PCR方法检测75株四川规模化鸡场分离菌是否存在NetB基因,结果均未检出。对胶原蛋白酶活力和种内拮抗能力的检测结果显示,不同来源的产气荚膜梭菌的胶原蛋白酶活力差异不显著,而其种内拮抗能力差异较大。3.动物试验动物试验一比较了产气荚膜梭菌CVCC2030与产气荚膜梭菌FR,单独使用菌液与菌液和球虫联合使用两种方式对雏鸡回肠组织的影响;用回肠绒毛长度和回肠组织病理学的变化表示回肠组织病变的程度;通过对不同日龄雏鸡回肠中产气荚膜梭菌活菌数的测定找出产气荚膜梭菌在灌喂菌液后的变化规律。结果显示,灌喂球虫能增加产气荚膜梭菌在回肠中的数量,也能增强产气荚膜梭菌对回肠组织的损伤作用;且产气荚膜梭菌CVCC2030和球虫联合使用能达到更好的致病效果。产气荚膜梭菌活菌数在灌喂后先升高后降低,峰值在23日龄。动物试验二是对球虫和产气荚膜梭菌CVCC2030的不同剂量组合进行比较。结果显示,采用不同使用剂量组合的球虫和产气荚膜梭菌对25日龄雏鸡回肠绒毛长度和组织病理学变化的影响没有显著差异。动物试验三,处理组在15日龄灌喂球虫卵囊100万个/mL/只;在17到20日龄每天灌喂一次产气荚膜梭菌CVCC2030,每次灌喂(1-2)×108CFU/mL/只,而对照组灌喂等量的生理盐水或无菌培养基。回肠菌群计数、回肠绒毛长度测定和PCR-DGGE分析结果显示:与对照组相比,球虫和产气荚膜梭菌CVCC2030共用能引起肉鸡回肠组织发生炎性反应和局部损伤,但不能引起严重的组织坏死;能降低回肠绒毛长度;引起乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌、类杆菌、总厌氧菌在试验肉鸡回肠中数量的减少,同时能增加回肠中大肠杆菌、总需氧菌的数量,引起肠道菌群失调。
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