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F-box蛋白是一类随着研究的深入而日益扩大的蛋白家族，它的一个共同特征是含有F-box结构域。作为SCF复合体(Skpl-Cullinl-F-box.E3连接酶的一部分，F-box蛋白是泛素蛋白降解系统的重要组成部分，它可参与细胞信号传导、细胞分裂与分化等多种重要的生物调节过程。
我们从本实验室家蚕蛹cDNA文库获得一个编码F-bo.only蛋白的基因，该基因序列全长213.bp，开放阅读框架(ORF)182.bp，编码606个氨基酸，预测蛋白分子量70 kD，GenBank登录号为DN237283.1，我们将其命名为BmFBX021(F-bo.onl.protei.21)。通过蛋白序列同源性比对，我们发现该蛋白与其他物种中相关蛋白具有一定同源性，但同源率不高，在20％-30％2间；通过潜在磷酸化位点和功能位点分析，我们预测该蛋白可能跟某个细胞过程的顺利进行或调控有关。为了制备抗BmFBXO21蛋白的多克隆抗体，我们将BmFBXO21基因的一部分进行PCR扩增后克隆到表达载体pET-28a(+)相应的酶切位点上，成功构建了融合蛋白表达质粒pET-28a-BmFBXO21。将该重组子转化大肠杆菌BL2.(DE3)，IPTG诱导重组菌后，裂解菌体作SDS-PAGE分析，显示在预期位置有一条特异性蛋白条带，且以包涵体的形式存在。用尿素溶解的方法处理包涵体后以亲和层析的方法纯化融合蛋白His-BmFBXO21。纯化后的蛋白进行FPLC反相柱分析，检测到纯度高达90％以上；质谱鉴定纯化的融合蛋白的分子量与理论值非常接近，说明融合蛋白表达纯化成功。用纯化的目的蛋白为抗原免疫雄性新西兰兔，制备了该蛋白的多克隆抗体，获得的抗体用间接ELISA法测得其效价为1:12800以上，Wester.blot检测抗体的特异性良好，自制的抗体符合进行下一步实验的要求。我们对BmFBXO21基因在mRNA转录、蛋白质表达以及免疫组织化学定位三个不同方面进行了表达分析，结果显示该基因在吐丝期蚕中表达量最高，主要分布于该时期蚕的头部、表皮、生殖腺和肠道。用免疫组织化学技术检测该蛋白在吐丝期蚕各组织中的具体分布部位，发现主要分布在头部的后部位置、肠道的周围以及睾丸的周围。用免疫荧光技术对目的蛋白进行亚细胞定位，发现主要存在于Bm5细胞(家蚕卵巢上皮细胞)的细胞质中。这些都为我们进一步研究BmFBXO21蛋白的相关功能提供了重要依据。