本文首先研究了磷脂酰乙醇胺甲基转移酶-2(PEMT2)启动子在正常肝细胞、肝癌细胞、其它肿瘤细胞中的活性。发现该启动子在正常肝细胞中的活性较高，而其它细胞中活性较低，表明PEMT2启动子作为负调控的开关是适宜的。为进一步增强其表达活性，构建“双开关”模型载体时在PEMT2启动子上游增加了白蛋白基因(ALB)的增强子。 　　采用AFP基因启动子和增强子作为正调控“开关”、采用PEMT2启动子和白蛋白基因(ALB)增强子作为负调控“开关”、采用单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因作为“自杀基因”，成功构建了“双开关”调控的人肝癌“自杀基因”治疗载体。 　　通过“单开关”模型及“双开关”模型载体对细胞的杀伤实验发现：无论是“单开关”还是“双开关”载体，对产AFP的肝癌细胞系HepG2都具有非常明显的杀伤作用。尽管在正常肝细胞中没有检测到AFP的表达，但是高剂量的更昔洛维(GCV)对正常肝细胞也有一定的杀伤作用，而“双开关”模型载体较“单开关”模型载体对正常肝细胞系HL-7702有明显的保护作用，而并不影响其对产AFP的肝癌细胞系HepG2的杀伤效率。虽然我们没有成功建立AFP启动子有少量活性的肝癌癌周细胞模型，但是这个结果也初步说明了“双开关”模型的高特异性。