【摘 要】
：
目的探讨体外获取培养、鉴定和标记的人脐带间充质干细胞（HU-MSCs）对阿霉素（ADR）诱导的局灶性节段性肾小球硬化（FSGS）小鼠肾脏的保护作用,以及相关机制的研究。方法（1）无菌条件下取人脐带,采用酶解法获得HU-MSCs,对获得的原代干细胞进行筛选、传代培养,观察细胞形态;流式细胞术检测HU-MSCs细胞表面抗原;进行细胞冻存备用;复苏后PKH-26标记示踪。（2）36只8周龄雄性Balb/
论文部分内容阅读
目的探讨体外获取培养、鉴定和标记的人脐带间充质干细胞（HU-MSCs）对阿霉素（ADR）诱导的局灶性节段性肾小球硬化（FSGS）小鼠肾脏的保护作用,以及相关机制的研究。方法（1）无菌条件下取人脐带,采用酶解法获得HU-MSCs,对获得的原代干细胞进行筛选、传代培养,观察细胞形态;流式细胞术检测HU-MSCs细胞表面抗原;进行细胞冻存备用;复苏后PKH-26标记示踪。（2）36只8周龄雄性Balb/c小鼠在适应性喂养一周后,随机分成2组:实验组（n=24）,以10.5mg/kg体重一次性尾静脉注射盐酸阿霉素;对照组（n=12）,同样方法注射等量的0.9%无菌生理盐水。于7、14、28天分别测量体重和接收尿液,观察小鼠体重变化及检测小鼠尿白蛋白含量;造模28天全部小鼠进行眼眶取血,检测血清肌酐、尿素氮;两组杀鼠各6只取肾脏组织进行光镜观察,判断模型制备是否成功。（3）造模成功后将实验组FSGS模型小鼠18只,随机分为FSGS模型组（FSGS,n=6）、干细胞治疗组（FSGS+HU-MSCs,n=6）、生理盐水治疗组（FSGS+NS,n=6）、将6只正常小鼠作为对照组（Control）。FSGS+HU-MSCs组予实验第33,40,47,54,61天分别一次尾静脉注射HU-MSCs（2*10~6）,FSGS+NS组、Control组分别在相同时间注射等量的0.9%无菌生理盐水作为对照。每组于实验第54、68天分别测量体重和收集24h尿,再次观察小鼠体重变化及检测小鼠尿白蛋白含量。在实验的第68天处死所有小鼠,收集血液和肾脏样本,检测血清肌酐和尿素氮,通过HE、PAS和Masson染色观察肾组织病理情况,应用免疫荧光半定量法检测TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达。结果（1）HU-MSCs的培养、鉴定结果:经胶原酶消化法分离培养的细胞于24-48小时后开始贴壁,3-5天贴壁细胞以梭形为主,经过10-14天的培养后融合率可达80-90%。流式细胞仪鉴定结果显示HU-MSCs特异性表达上皮细胞表面抗原如CD29、CD44、CD90、CD105、CD126,而不表达造血细胞、内皮细胞表面标志如CD34、CD45和CD31,不表达主要组织相容性抗原HLA-DR。（2）阿霉素诱导FSGS模型小鼠结果显示:实验组小鼠体重明显低于对照组（P<0.01）,尿白蛋白、血清肌酐、尿素氮水平明显高于对照组（P<0.05）;28天肾脏病理示肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生,节段中度加重,部分可见毛细血管袢受压狭窄、球囊粘连伴足细胞增生,肾小管上皮细胞肿胀变性,可见管型,肾间质可见淋巴细胞浸润,小血管管壁增厚。（3）HU-MSCs移植治疗后结果示:FSGS+HU-MSCs组、FSGS组、FSGS+NS组与Control组相比体重显著降低（p<0.001）,尿白蛋白、血肌酐、尿素氮水平均显著增加（p<0.001）;其中FSGS+HU-MSCs组较FSGS组和FSGS+NS组体重显著增加（P<0.05）,尿白蛋白、血肌酐、尿素氮水平均显著降低（P<0.01）;实验第68天（即干细胞治疗后第35天）FSGS+HU-MSCs组肾脏病理显示肾小球系膜细胞、系膜基质轻度增生,肾小管管型消失,空泡变性显著减轻,肾间质淋巴细胞浸润及纤维化减轻,未见充血出血;免疫组化结果显示FSGS组和FSGS+HU-MSCs组较Control组TGF-β1、Smad3表达明显增加（P<0.001）,Smad7表达明显减低（P<0.001）;而FSGS+HU-MSCs组与FSGS组相比TGF-β1和Smad3表达显著减弱,Smad7蛋白水平显著增加,差异性均为P<0.001。结论HU-MSCs可能通过TGF-β1/Smad信号通路修复FSGS小鼠肾脏纤维化损伤进而减缓疾病的进展。
其他文献
1目标和概述矿山工作环境恶劣，交通事故发生率较高，疲劳驾驶现象普遍，发达国家追求零死亡率，安全问题是矿山行业关注的重要指标。矿山因矿区封闭环境、矿山道路崎岖、开采环境恶劣，再加上驾驶员容易疲劳及误操作而引发事故，存在极大的安全隐患，无人化已经是刚性需求，其无人化落地条件优良且实施过程中无政策法规阻力；机械无人化能减少人为操作引发的事故，提高矿山作业的安全性，
针对钢桥环氧铺装局部坑槽维修的技术难题,提出了一种新型冷拌快固树脂混合料,通过马歇尔试验确定了最佳油石比,并评估了高温性能、低温性能、抗水损性能和抗滑性能等路用性能。试验结果表明,PTB树脂的黏度在20℃、30℃、40℃条件下,达到3 000cP的时间分别为39min、33min和21min,固化速度较快。PTB型树脂的拉伸强度接近原铺装采用的环氧沥青,断裂延伸率也超过100%。PTB型树脂混合料
本文利用1979-2018年的ERA-Interim再分析逐日资料和GPCP（Global Precipitation Climatology Project）降水资料,通过提取周期约为30-60天的阿留申低压次季节尺度异常事件,使用位相合成的方法研究了冬季阿留申低压在次季节尺度上异常变化情况及其对泛北太平洋地区降水和气温的影响。首先探讨了冬季阿留申低压次季节尺度异常的基本特征和演变规律,其次分别
热带气旋是一种破坏力极强、对我国影响范围广泛的灾害性天气系统。为降低热带气旋带来的损失,提高对热带气旋路径和强度的预报能力至关重要。集合卡曼滤波是一种广泛应用于气象领域的数据同化方法,用此方法同化卫星观测可以显著改进热带气旋的预报。由于目前计算资源限制了集合成员个数,需要使用局地化函数将观测的影响限定在观测位置附近。然而,卫星观测是对观测位置气柱的整体观测,难以确定卫星在垂直方向的观测位置和影响范
溶解性有机质（DOM）普遍存在于天然水体环境中,是环境中有机污染物的重要吸附剂。有机污染物在DOM上的吸附分配行为影响其在水体环境中的归趋与生物有效性。DOM中非极性组分的占比反映了其疏水性,疏水性是影响上述分配行为的重要性质。有机碳标化分配系数(KOC)是定量描述分配行为的最常用指标。目前关于大尺度环境下DOM疏水性的时空分布模式及其主控因子与KOC高通量准确预测的研究较为有限。本研究首先以太湖
信息的获取,自古以来就是人类赖以生存的必要手段。原始封建社会人们通过烽火狼烟,鸿雁传书等方式实现信息的交流。这些方式虽然记录了人类文明的璀璨,也凝聚了古代人民的智慧结晶,但是这些原始的通信方式,传递速度慢,信息不准确,易丢失,而且不能被灵活操控。随着人类文明的不断进步,世界各国不断的深入交流,全球化成为了必然的趋势,如何快速准确获得信息成为迫在眉睫的事情。众所周知,光子是世界上传播速度最快的粒子,
研究背景心力衰竭（heart failure,HF）作为多种病因导致的心脏结构性损害的共同终末期表现,已经成为全球性的公共卫生问题。在60岁及以上的人群中,心力衰竭发病率为2%,其中射血分数保留的心力衰竭（heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF）更为普遍。由于HFpEF的病理生理过程不十分清楚,且缺乏有效的实验模型,导致HFpEF缺
滨海滩涂湿地是地球上最具生产力的系统之一,其具有的生态服务功能众多,包括为生物提供养分和栖息地、保滩固沙、营养物质过滤器、缓冲调节及固碳等。互花米草（Spartina alterniflora）入侵滩涂湿地生态系统影响底栖动物组成及丰富度、改变潮汐水盐交互过程、改变土壤理化性质影响植被分布格局,导致生态系统与土著生态系统有较大差异,是造成滩涂湿地生态系统功能退化的重要原因。有鉴于此,论文于江苏大丰
量子计算和量子通信是现在的热门问题,其中强大的抗干扰能力是量子计算和量子通信得以实现的必要保障之一,而量子纠错码的诞生便很好地解决了通信过程中的一些干扰问题.一般的量子纠错码是基于有限域来构造的,具有一定的局限性,本文在前人的基础上,构造了基于有限交换群的量子纠错码,包括加性的量子纠错码和非加性的量子纠错码,得到了基于有限交换群的量子Hamming界和量子Singleton界,以及最重要的Mac