【摘 要】
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激光诱导荧光检测是毛细管电泳芯片的主要检测手段之一,其中又以共聚焦式检测装置的灵敏度和信噪比最高,是目前最为常用的检测手段。共聚焦光路的成像特点使得其聚焦操作难度较
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激光诱导荧光检测是毛细管电泳芯片的主要检测手段之一,其中又以共聚焦式检测装置的灵敏度和信噪比最高,是目前最为常用的检测手段。共聚焦光路的成像特点使得其聚焦操作难度较大,目前主要依靠操作人员手工操作,可靠性、重复性差。本文在分析国内外研究现状的基础上,设计了基于图像处理辅助聚焦的共聚焦式激光诱导荧光检测装置。 本文采用共聚焦式激光诱导荧光检测原理,设计了CCD辅助检测及光路切换装置,通过图像处理获取离焦状态及确定运动目标位置,利用电移台的移动实现自动聚焦及自动跟踪。以AT89C52单片机为核心设计了检测装置的下位机控制系统,采用Keil C语言编写程序,完成三维电控平台的控制、光路切换、高压控制、信号采集、安全保护等功能。系统可以工作在脱机和联机两种模式,脱机时用户通过键盘和LCD操作,联机时由上位机通过串行口控制。 上位机程序采用VC++编写,主要完成利用图像采集卡获取CCD图像,并进行噪声抑制、栅格化等预处理,以及图像保存、打开等常规操作。根据图像清晰度评价函数判断聚焦情况,控制Z轴电动位移台移动,采用粗调细调相结合的策略加快聚焦速度,使电泳芯片到达最佳聚焦位置。通过改进的三帧差分法计算运动目标的位置,控制X、Y轴电动位移台跟踪目标。接收下位机传送的荧光信号,并实时绘制曲线。 本文设计组建的装置能较好地完成自动聚焦、自动跟踪、荧光信号采集等任务,可以在毛细管电泳芯片研制过程中的各个阶段进行观察、测试和数据采集,为芯片的深入研究提供依据。本装置自动化程度较高,方便易用,基本达到了预期效果。
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