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目的探讨在中老年尼古丁依赖人群中5-HT2AR基因多态性分布特征及初步探讨尼古丁依赖人群的5-HT2AR基因启动子区甲基化水平特征。方法第一章:选择2018年06月至2019年11月间,在青岛大学附属医院保健科收集的符合本研究纳入标准的中老年吸烟和非吸烟人群共130例。根据尼古丁依赖检验量表(FTND)得分进行分组:尼古丁依赖组及对照组。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)和DNA直接测序两种方法共同对5-HT2AR基因的rs6311位点进行基因多态性的检测。5-HT2AR基因rs6311位点的基因多态性采用Primer3软件进行在线分析。采用SPSS 26.0软件对数据进行统计学分析。应用Shapiro-Wilk’s进行正态检验,计数资料以例数和百分比表示;计量资料以均数±标准差表示,计量资料两组间比较采用t检验,计数资料两组间比较采用卡方检验,相关性分析采用spearman相关分析,P<0.05表明有统计学意义。第二章:采用Illumina Hiseq平台,以2×150bp的双端测序模式进行高通量测序,对所有研究对象的基因组甲基化水平进行检测。检验连续变量为正态分布的采用t检验,不是正态分布的采用Wilcoxon秩合检验。5-HT2AR基因启动子区甲基化水平采用Wilcoxon秩合检验。P<0.05认为差异具有统计学意义。结果第一章:5-HT2AR基因多态性分析在130例研究对象的外周血提取的DNA检测样本结果中,5-HT2AR基因的rs6311位点符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。rs6311位点的基因型频率分布依次为GG型占31.5%,GA型占49.2%,AA型占19.3%;统计分析结果表明,尼古丁依赖组和对照组人群之间的5-HT2AR基因rs6311位点的基因型分布及等位基因频率差异不具有统计学意义(P>0.05)。第二章:5-HT2AR基因启动子区甲基化分析1.5-HT2AR基因不存在完整的CpG岛,故本研究检测了5-HT2AR基因启动子区2个片段甲基化水平。甲基化结果表明,尼古丁依赖组和对照组之间在5-HT2AR基因启动子区2个片段位点的甲基化水平上均没有显著差异(P>0.05);2.通过检测尼古丁依赖组与对照组在5-HT2AR基因2个片段上的4个位点的甲基化状态,发现这两组5-HT2AR基因的4个位点甲基化程度不存在统计学差异(P>0.05),但进一步分析表明,这两组间的甲基化水平还是存在差异。其中5-HT2AR基因启动子区的CpG84位点和CpG177位点的甲基化水平尼古丁依赖组高于对照组,CpG69位点和CpG87位点的甲基化水平尼古丁依赖组低于对照组;3.对5-HT2AR基因rs6311位点与启动子区相关甲基化位点做线性回归分析,发现5-HT2AR rs6311位点多态性与5-HT2AR启动子区两个CpG片段中的CpG69、CpG84、CpG87、CpG177位点甲基化之间存在相关性,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.5-HT2AR基因的rs6311位点的多态性与尼古丁依赖的发生无明显相关性。2.5-HT2AR基因的两个Cp G片段中的Cp G69、CpG84、CpG87、CpG177位点甲基化水平与尼古丁依赖的发生无明显相关性。但5-HT2AR基因的rs6311位点的多态性与5-HT2AR基因的CpG69、CpG84、CpG87、CpG177位点甲基化程度密切相关。