CSISV的部分特性研究及病毒纯化和中和试验

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鸡生长与免疫抑制综合征(暂定名,CSISV)主要引起家禽的生长和免疫抑制,这种免疫抑制会导致多种混合感染或继发感染。生长抑制引起生产性能降低,给养殖业带来严重的损失。刘兴友教授等对该病进行了较深入的研究,证明是由一种新的病毒引起的。本课题在前期研究的基础上,进一步开展了病毒的特性、纯化鉴定、中和试验等研究。1日龄罗曼、海兰蛋雏鸡、AA肉仔鸡、三黄雏鸡和樱桃谷肉雏鸭人工感染CSISV后均能发病,但蛋雏鸡、肉仔鸡、肉雏鸭在发病率、死亡率、生长抑制等方面存在一定差异。罗曼、海兰蛋雏鸡感染后鸡第5天开始出现发病,发病率高达60%,第7天开始山现死亡,第14天出现死亡高峰,死亡率达30%和30%。AA肉仔鸡感染后第2天开始出现发病,发病率高达80%,第6天开始出现死亡,第14天出现死亡高峰,死亡率50%。三黄鸡感染后第4天开始发病,第7天出现发病高峰,第6天开始出现死亡,未出现明显的死亡高峰,死亡率为23.1%。感染后所有未死亡鸡均表现出生长迟缓,20日龄后感染组体重比对照组低,罗曼蛋鸡、海兰蛋鸡、AA肉仔鸡、三黄雏鸡的生长抑制率分别为54.31%、54.56%和35.51%、37.3%。樱桃谷肉雏鸭感染后没有表现出明显的发病症状,但生长迟缓,28日龄时感染组比对照组体重减轻了52.93%。CSISV病毒能被2%甲醛完全灭活,紫外线照射20分钟能完全灭活该病毒,5%H2O2不能完灭活该病毒。CSISV对酸碱有较强的耐受性,临界值为pH2.0和pH11.5。CSISV的浮密度,为1.16~1.18。SDS-PAGE电泳表明,CSISV尿囊液与空白尿囊液相比,在约31kDa处明显多出一条带(A),而在66.2kDa~97.4kDa之间的三条带的蛋白量比空白尿囊液多。经Western-blotting证明,A带能与CSISV抗血清发生阳性反应,说明是特异性的,此蛋白可能是具有抗原性的蛋白。对CSISV病毒进行pH3和pH10.5的酸碱处理后,感染SPF鸡胚,得到纯化的病毒。并制备了相应的抗体,同时把纯化后的病毒接种于10日龄SPF鸡胚,对比观察引起的发病状况、病毒形态,通过血清中和试验,证明纯化后获得的CSISV-pH3.0和CSISV-Ph10.5与CSISV可能为一种病毒。交叉中和试验表明,CSISV不与IBDV发生交叉中和反应,说明与IBDV不存在抗原关系。
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