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第一部分CC10在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与癌细胞凋亡的关系目的研究CC10蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达并观察其与癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化技术检测CC10在43例NSCLC及20例肺良性疾病组织石蜡标本中的表达，并借助HPIAS-1000图像系统对结果进行分析。应用TUNEL技术检测其中的43例NSCLC癌细胞的凋亡并分析其与CC10表达的相关性。结果CC10在NSCLC中的表达为46.51％（20／43），明显低于肺良性病变组织85.0％（P＜0.01）；CC10在肺癌中的表达与分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关，但与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤组织学分型无关（P＞0.05）；CC10表达阳性肺癌组织细胞凋亡指数（AI）为5.585±1.7822％，CC10表达阴性肺癌组织细胞凋亡指数（AI）为2.8565±1.3990％，癌细胞凋亡指数（AI）与NSCLC中CC10蛋白的表达有显著相关性（Rs=-0.0211，P＜0.05）。结论NSCLC中CC10的表达下调，NSCLC细胞的凋亡的与CC10的表达下调密切相关。第二部分构建及鉴定人CC10基因真核细胞表达载体目的构建及鉴定人CC10基因真核细胞表达载体pcDNA3.1-hCC10。为后续实验奠定基础。方法RT-PCR法从人肺正常组织的总RNA中克隆出273bp大小的cDNA片段，限制性内切酶HindⅢ／BamⅠ作用真核细胞表达载体pcDNA3.1，取纯化的PCR扩增产物约30ng和pcDNA3.1质粒载体大片段约75ng，在T4 DNA连结酶的作用下进行连接反应。再将其将该重组子转化DH5a．感受态大肠杆菌，筛选及抽提阳性克隆菌株，HindⅢ／BamⅠ双酶酶切该重组子并行序列鉴定。结果该273bpcDNA与基因文库中CC1外显子1序列完全相同，人CC10基因已经正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中。结论成功构建了pcDNA3.1-hCC10真核细胞表达载体，为进一步研究肺癌的发病机制及治疗打下基础。第三部分建立稳定表达外源性人CC10基因的肺癌细胞株目的建立稳定表达外源性人CC10基因的肺癌A549细胞株方法大提试剂盒提取pcDNA3.1-hCC10，并利用脂质体法分别将pcDNA31-hCC10及pcDNA3.1转入试验组A及B组的A549细胞中，而C组未进行任何转染的对照组，经G418筛选获得稳定表达．Western blot法检测转染各组A549细胞CC10蛋白的表达，RT-PCR检测CC10mRNA的表达。结果A组A549细胞CC10mRNA及蛋白的表达较其他两组高。结论我们成功建立了稳定表达外源性人CC10基因的肺癌A549细胞株，为下步的研究工作奠定基础。第四部分人CC10基因逆转肺腺癌细胞系A549细胞恶性生物学行为的影响目的研究人CC10基因对肺腺癌细胞系A549细胞增殖及凋亡的影响，及其对CyclinD1蛋白及mRNA表达的影响。方法分别通过脂质体法将所构建的真核表达载体pcDNA3.1-CC10（A组）及空质粒（B组），并设未行转染的阴性对照组（C组）：；通过Hoechst33258染色法、透射电镜及、AnnexinV—PI双标法、平板克隆形成实验、A549细胞移植裸鼠成瘤等实验观察CC10基因对各组A549细胞在体内、体外的凋亡及生长的影响；流式细胞仪及Western Blot、RT—PCR检测CC10对A549细胞细胞周期及周期蛋白CyclinD1的表达的影响。结果A组细胞体外生长、；克隆形成及体内荷瘤的生长明显受抑，可观察到典型的细胞凋亡形态增多，细胞凋亡率增高，与B组及C组相比具有统计学差异，p＜0.05；隧转染时间的延长，更多A549细胞停滞与G1期，CyclinD1基因表达也逐渐下调。结论人CO10基因能逆转肺癌A549细胞恶性生物学行为。