忍冬藤复方干预急性痛风性关节炎模型大鼠的实验研究

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目的:通过忍冬藤复方干预急性痛风性关节炎(Acute gouty arthritis,GA)模型大鼠对其进行药效学验证;通过检测GA模型大鼠血尿酸值及关节软骨、关节液中IL-1β、TNF-α水平的表达,研究忍冬藤复方治疗GA的作用机理和对此病的防治效果;通过观察忍冬藤复方对GA模型大鼠的行为学改变,验证忍冬藤复方降低炎症的疗效。方法:将48只SD大鼠,体重200±20g,雌雄各半,采用随机数字表法分为6组,分别为空白对照组(8只)、模型组(8只)、秋水仙碱组(8只)、忍冬藤复方高剂量组(8只)、忍冬藤复方中剂量组(8只)、忍冬藤复方低剂量组(8只)。通过灌服乙胺丁醇和腺嘌呤制造大鼠高尿酸血症模型,在高尿酸血症的基础上建立大鼠急性痛风性关节炎模型。模型成功后,药物干预,大鼠灌胃剂量按照“人与动物体表面积等效剂量”计算,得出的剂量为中剂量组剂量,在中剂量组基础上的1/2、2倍分别为低、高剂量组;秋水仙碱组按照“人与动物体表面积等效剂量”计算所得的等效剂量(1.05mg/kg)灌服,空白对照组灌服等体积的生理盐水,连续灌胃干预14d后,心脏负压采血,脱颈处死大鼠,收集关节液、分离关节软骨,将关节冲洗液放入低温冰箱保存,关节软骨放入液氮罐保存,检测时取出软骨,将其研磨粉碎,离心后收集上清检测;关节冲洗液离心收集上清后检测,数据进行统计学分析。结果:①忍冬藤复方与秋水仙碱均可以使模型大鼠的血尿酸值下降,与模型组比较差异显著(P<0.01),忍冬藤复方高、低剂量组和西药组之间有显著性差异(P<0.05)。忍冬藤中剂量组与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②造模72h后忍冬藤复方与西药可以使GA大鼠关节肿胀度下降,有显著性差异(P<0.01),忍冬藤复方与西药组间比较,有显著性差异(P<0.01),忍冬藤复方中剂量组与忍冬藤复方高、低剂量组之间,有显著性差异(P<0.01)。③忍冬藤复方和西药可以减轻模型大鼠的炎症,给药48h后,忍冬藤复方组、西药组和模型组比较,有显著性差异(P<0.01);给药后48h,忍冬藤复方中剂量组与西药组比较,差异有显著性统计学意义(P<0.05);给药72h后,忍冬藤复方各组与西药组比较,无显著性统计学意义(P>0.05),忍冬藤复方各组之间比较,无显著性统计学意义(P>0.05)。④忍冬藤复方和西药均可以减轻模型大鼠关节疼痛,给药24h、48h后忍冬藤中剂量组、西药组与模型组比较,有显著性差异(P<0.01),给药24h后忍冬藤复方各组与西药组,比较无意义(P>0.05)。⑤ELISA法检测显示:忍冬藤复方和西药均可以降低关节液中IL-1β的表达,与模型组比较,有显著性差异(P<0.01),忍冬藤复方各组和西药组比较,有显著性差异(P<0.01)。忍冬藤中、低剂量组间比较,有显著性差异(P<0.01);忍冬藤中、高剂量组比较两组之间无显著性统计学意义(P>0.05);忍冬藤复方和西药组及模型组三组之间比较,有显著性差异(P<0.01),均可抑制GA大鼠关节液TNF-α的表达,忍冬藤复方中剂量组与空白组之间,无意义(P>0.05),忍冬藤复方组和西药之间,有显著性差异(P<0.01),忍冬藤复方中、高剂量组组间比较,无显著性统计学意义(P>0.05),但与低剂量之间,有显著性差异(P<0.01);忍冬藤复方和西药,两者都可以抑制IL-1β在GA大鼠关节软骨的表达,与模型组比较,差异有显著性统计学意义(P<0.01),忍冬藤复方组与西药组比较,有显著性差异(P<0.01),忍冬藤复方中剂量组和空白组之间,无意义(P>0.05),忍冬藤复方中、高剂量组,两组之间比较,无意义(P>0.05),但与忍冬藤低剂量组之间,有显著性差异(P<0.01)。结论:忍冬藤复方可以使HUA模型大鼠的SUA和GA模型大鼠的关节肿胀度降低,可以改善大鼠的跛行步态,减轻关节疼痛和炎症,其对GA抗炎消肿、止痛的疗效可能是通过抑制IL-1β和TNF-α的过高表达而起作用的。
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