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【目的】阻塞性黄疸血管低反应性是指阻塞性黄疸患者血压波动,对内源性、外源性血管活性物质的反应性降低,使血流动力学紊乱,严重影响治疗和预后,围手术期的并发症和死亡率均明显升高。但是,目前对于阻塞性黄疸血管低反应性的研究主要在心功能以及其整体性方面,对血管本身的研究较少。本研究拟通过动物实验以及细胞实验对P38MAPK-Phsp27在阻塞性黄疸血管低反应性中的作用进行探讨。【方法】1、Sprague-Dawley(SD)大鼠进行胆总管结扎手术,建立阻塞性黄疸大鼠模型(bile duct ligation,BDL),术后第一天开始腹腔注射给予P38MAPK抑制剂SB203580,连续给药至术后第七天,根据是否有给药处理,将大鼠分为四组:Sham组、BDL组、Sham+SB203580组和BDL+SB203580组,检测四组大鼠血清肝功能指标。2、离体血管环张力检测实验,测定四组大鼠离体胸主动脉环对不同浓度梯度去甲肾上腺素(Noradrenaline,NA)的收缩反应和对乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)的舒张反应的变化。3、取四组大鼠的胸主动脉,用Westernblot和免疫组织化学检测P-Hsp27、F-actin、hsp27、P38MAPK、α-SMA蛋白表达。4、培养大鼠胸大动脉平滑肌细胞,给予不同浓度梯度胆红素以及SB203580处理后用Westernblot和免疫荧光检测P-Hsp27、F-actin、hsp27、P38MAPK蛋白表达,用CCK8检测细胞增殖情况。【结果】1、BDL组和BDL+SB203580组与Sham组和Sham+SB203580组相比,血清总胆红素(TB)、谷胺酰转氨酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平明显升高,而BDL组和BDL+SB203580组之间相比以及Sham组和Sham+SB203580组之间相比TB、ALT、AST并没有明显差异。2、大鼠离体血管环张力检测结果表明,BDL组与Sham组相比大鼠胸主动脉环对NA的收缩反应和ACH的舒张反应均降低,BDL+SB203580组与BDL组相比收缩反应和舒张反应均明显升高,Sham组与Sham+SB203580组相比收缩反应和舒张反应均无明显变化。3、大鼠胸主动脉Westernblot和免疫组织化学结果显示,BDL组P-Hsp27、F-Actin水平明显高于BDL+SB203580组、Sham组和Sham+SB203580组,而BDL+SB203580组、Sham组和Sham+SB203580组之间无明显统计学差异;Hsp27水平在四组中均无明显统计学差异;BDL组α-SMA水平明显低于BDL+SB203580组、Sham组和Sham+SB203580组;P38MAPK水平在BDL+SB203580组和Sham+SB203580组明显降低。4、培养大鼠胸大动脉平滑肌细胞,CCK8检测细胞增殖结果显示随着胆红素浓度梯度增加,细胞增殖逐步降低,SB203580共培养后在胆红素浓度100、200、400umol/L组细胞增殖明显增强,有统计学差异。Westernblot和免疫荧光结果显示随着胆红素浓度梯度增加,P-Hsp27、F-actin表达水平逐渐增加,SB203580处理后P-Hsp27、F-actin表达水平降低;Hsp27表达水平在不同胆红素浓度梯度以及SB203580处理后均无明显变化;P38MAPK表达水平在SB203580处理后均降低。【结论】本研究结果显示通过P38MAPK通路抑制Hsp27磷酸化可以改善阻塞性黄疸大鼠离体血管收缩和舒张反应,此外还可以使P-Hsp27、F-Actin水平降低,α-SMA水平增高,说明阻塞性黄疸大鼠血管平滑肌细胞减少;不同胆红素浓度梯度处理大鼠血管平滑肌细胞,P-Hsp27、F-actin表达水平明显增加,说明肌动蛋白细胞骨架发生了聚合的重构变化;SB203580处理细胞之后,Hsp27磷酸化明显被抑制,F-actin表达水平降低,说明肌动蛋白细胞骨架重构有所恢复。综上所述,本研究表明抑制Hsp27磷酸化可以改善阻塞性黄疸大鼠离体血管收缩和舒张反应,其机制可能与血管平滑肌细胞肌动蛋白细胞骨架重构有关。