目的:建立大鼠肺孢子菌肺炎模型,对肺孢子菌基因环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测技术进行探索,并对慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)患者支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)样本进行LAMP检测以探讨其临床应用价值。方法:1建立肺孢子菌感染模型将20只Wister大鼠随机分为实验组(16只)和对照组(4只),实验组大鼠腹股沟皮下注射地塞米松磷酸钠注射液,对照组腹股沟皮下注射生理盐水,同时两组大鼠均给予正常颗粒饲料喂养,饮用纯水配制的含四环素的溶液(浓度1 g/L)以预防细菌感染,食水量不加限制,构建肺孢子菌肺炎模型。2鼠肺肺孢子菌病原学检测2.1诱导8周后处死全部大鼠,解剖取其病变部位肺组织做肺印片,环六亚甲基四胺银(Gomort methenamine silver,GMS)染色后镜检肺孢子菌。2.2提取所有大鼠肺组织脱氧核糖核酸(Deoxyribo Nucleic Acid,DNA),对样本进行LAMP检测。3选择COPD患者BALF标本20例,提取DNA后进行LAMP检测。结果:1诱导感染过程中观察发现实验组大鼠逐渐出现呼吸急促、眼睛和鼻子分泌物增多、饮食水量减少、反应迟钝、毛发稀疏及颜色变暗等现象。从第3周开始,实验组大鼠体重明显低于对照组;实验组大鼠体重从第6周开始明显下降,持续至第8周实验结束。2实验组16只大鼠肺组织印片后行GMS染色,5只大鼠肺组织印片油镜下见到肺孢子菌包囊,肺印片GMS染色镜检的阳性率为31.3%(5/16),对照组4只大鼠阳性率为0。实验组大鼠肺组织DNA样本LAMP法检测阳性率为87.5%(14/16),对照组为0。比较肺印片GMS染色镜检和LAMP检测的阳性率,差异有统计学意义(P=0.025)。3对20例COPD患者的BALF标本的DNA进行LAMP检测,阳性率为30%(6/20)。结论:1通过向大鼠腹股沟皮下注射地塞米松磷酸钠注射液可成功构建肺孢子菌动物感染模型,建模方法安全可靠;2对于肺孢子菌LAMP检测方法比GMS染色镜检法检出率高;3 LAMP基因检测方法或可用于检测慢性阻塞性肺疾病患者肺孢子菌定植情况。