饮酒导致的疾病和健康问题,特别是酒精性肝损伤等一直受到广泛关注,而很多伤害都与肠道屏障的健康状况息息相关。酒精可以通过破坏黏膜结构、氧化应激反应和炎症反应等方面损伤肠道屏障,使有害物质进入体内,进而损伤器官组织。壳寡糖(COS)作为一种天然的碱性低聚物,以其来源广、无毒害、易生物降解和解酒护肝等生理活性越来越受到重视。本论文以COS为主要研究对象,探究其对大鼠酒精性肠道损伤的干预作用,以期为COS功能的开发,以及开发安全有效的肠道保护产品提供理论支持。本论文的主要研究内容与结果如下:(1)通过对Wistar大鼠进行连续42 d的灌胃酒精处理建立肠道损伤模型,灌胃酒精前分别灌胃180 mg/kg谷氨酰胺、22.5 mg/kg、45 mg/kg和90 mg/kg COS。通过测定饲养过程中大鼠体重、进食量以及饲养结束大鼠器官指数和小肠重/长的值,并对小肠进行病理组织学检查,分析大鼠的生长状况以及小肠伸缩性和形态。结果表明:酒精对小肠中十二指肠的损伤较空肠和回肠严重。COS可以增加大鼠体重、降低酒精对器官的损伤,还可以改善大鼠饮酒后十二指肠和回肠伸缩性的变化,缓解大鼠的肠道不适;同时,通过维持绒毛形态、增加绒毛长度、降低肌层厚度,使绒毛长度与隐窝深度比值增加,缓解酒精对大鼠小肠结构和功能的损伤。(2)在大鼠酒精性肠道损伤模型中探讨了COS对肠粘膜屏障的保护作用。通过测定大鼠血浆中D-乳酸(D-LA)、内毒素(LPS)含量和二胺氧化酶(DAO)活性,以及小肠紧密连接蛋白的表达情况,探究壳寡糖的肠黏膜屏障保护效果。结果表明:COS的干预可以显著降低大鼠血浆中D-LA、LPS含量以及DAO活性,降低由酒精引起的肠粘膜通透性的增加。COS可以通过提高Occludin和ZO-1、降低Claudin-4的基因和蛋白表达水平,修复小肠上皮细胞间的紧密连接结构。(3)在大鼠酒精性肠道损伤模型中探讨了COS对小肠氧化应激的干预作用。通过测定小肠总抗氧化能力、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及丙二醛(MDA)和蛋白质羰基含量表征小肠的氧化损伤情况。结果表明:COS摄入可以提高小肠组织的总抗氧化能力,显著提高大鼠小肠组织的SOD和GSH-Px活性,显著降低组织中MDA和蛋白质羰基含量,缓解灌胃酒精导致的小肠的氧化损伤。(4)在大鼠酒精性肠道损伤模型中探讨了COS对炎症反应的干预作用及机制。通过测定血浆中促炎因子含量,探究COS的抗炎水平;测定小肠中NO含量和iNOS活性,以及炎症相关因子的表达,探究壳寡糖对肠道炎症的调节作用。结果表明:COS可以下调血浆中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,缓解全身炎症;此外,COS可以通过下调小肠IL-6、IL-1β和TNF-αmRNA表达以及降低iNOS活性下调小肠组织NO含量,缓解肠道炎症;同时,COS可以下调TLR4、TLR2和TRAF6 mRNA的表达量,下调TLR4和核内磷酸化NF-κB p65的蛋白表达,表明COS可能通过调控抑制TLR4蛋白表达、抑制NF-κB通路的激活实现缓解小肠炎症的作用。