邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)是一种常用的增塑剂,分布十分广泛。DEHP可以经口、皮肤和呼吸道进入人体,且可通过食物链在人体内富集。肝脏是DEHP的主要作用器官之一。已有研究证实,DEHP一方面诱导机体氧化应激,引发机体脂质过氧化;另一方面DEHP可诱导肝脏脂代谢紊乱。但是,大多数研究主要集中于DEHP对围产期大鼠及子代大鼠的研究,且使用的DEHP剂量大都超过1000mg/kg bw,与实际在生活中摄入的DEHP浓度相差较大。此外,高脂饮食(HFD)也能引起机体氧化应激和脂代谢紊乱。因此,本文通过RT-PCR、生化分析法、酶联免疫法及H&E染色研究了DEHP联合HFD对大鼠氧化应激及脂代谢的影响,为进一步研究DEHP和HFD联合作用对代谢综合征及其对人群健康的影响提供借鉴。实验中,将30只雄性SD大鼠随机分为5组,每组6只,其中1组作为对照组,喂以普通饲料,其余4组大鼠均喂以HFD,同时通过灌胃法暴露于不同浓度的DEHP(0,0.5,10和100 mg/kg bw/天)8周。通过研究发现,(1)与对照组相比,DEHP和HFD联合饲养大鼠能增加大鼠的体重和血清中肝功能指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量,100mg/kg bw DEHP染毒组大鼠的肝重、肝体比和脂体比都显著增加,且反应肝细胞损伤的AST/ALT的比值远高于正常范围。(2)肝脏组织病理学观察发现,对照组大鼠肝脏中未发现病理学变化,HFD大鼠发生不同程度肝脂肪变性。使用DEHP染毒处理后,出现水肿现象。高剂量组发生了炎性细胞浸润和少量局灶性坏死现象。(3)DEHP和HFD联合作用后,大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量较对照组均升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量较对照组降低。(4)与对照组相比,10mg/kg bw和100mg/kg bw DEHP染毒组大鼠肝脏丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)水平显著升高;同时反应蛋白氧化损伤的蛋白羰基化(PC)呈上升趋势,肝脏中抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)表达下降。(5)DEHP和HFD联合喂养大鼠较对照组肝脏中白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达升高,100mg/kg bw DEHP染毒组大鼠肝脏IL-6和TNF-αmRNA表达显著升高。(6)与对照组相比,DEHP联合HFD染毒大鼠血清游离脂肪酸(FFA)和葡萄糖含量升高,胰岛素(INS)含量降低。(7)与对照组相比,DEHP联合HFD染毒大鼠肝脏中与脂质合成相关基因的mRNA表达升高。与HFD组相比,10mg/kg bw和100mg/kg bw DEHP染毒组固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)mRNA表达显著升高。(8)与对照组相比,DEHP和HFD联合大鼠肝脏脂肪酸氧化分解相关基因mRNA表达升高。与0.5mg/kg bw DEHP染毒组相比,10mg/kg bw和100mg/kg bw DEHP染毒组肉碱棕榈酸转移酶1(CPT-1)mRNA表达降低。(9)与对照组相比,DEHP和HFD联合大鼠肝脏胆固醇合成相关的羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)和低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA表达水平显著下降。这些结果表明,(1)DEHP联合HFD导致大鼠肝细胞发生增殖引发大鼠肝损伤,且损伤程度随DEHP剂量增加而加重。同时DEHP和HFD联合作用导致大鼠血脂紊乱,发生氧化应激和炎症反应。(2)在本实验DEHP剂量范围内,DEHP联合HFD可能增加了SREBP-1c介导的脂质合成和过氧化物酶体增殖激活受体α(PPAR-α)诱导脂肪酸氧化。DEHP和HFD联合作用导致大鼠肝脏脂质紊乱,发生肝脏脂质沉积,可能是由于脂质合成效果强于脂质分解效果导致的。(3)氧化应激、炎症和脂代谢三者相互作用可能是DEHP联合HFD大鼠肝脏损伤的重要原因,进而增加大鼠发生非酒精性脂肪肝(NAFLD)2型糖尿病的发生的可能性。