对硫磷降解菌的分离筛选及提高其降解作用研究

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对硫磷是农业生产中普遍使用的广谱杀虫剂,化学名称为O,O-二乙基-O-(对硝基苯基)硫代磷酸酯,属于高毒、内渗性有机磷农药,在自然界的残留时间为3周,使用不当或长期连续使用对人体和环境会造成较大的危害。因此,研究对硫磷的微生物降解作用具有较大的实际意义。本研究从受对硫磷污染土壤中筛选分离到1株能以对硫磷为唯一C源的菌株D5-2,通过形态特征及基本生理生化实验研究,初步确定该菌株属于不动杆菌属微生物(Acinetobacter sp.)。采用分光光度比浊法研究其最佳生长条件,结果表明:D5-2最佳生长温度为28℃,最佳初始pH值5-8,最佳C、N源分别为柠檬酸钠、酵母粉,在150mL的培养瓶中培养基体积为50mL时生长最好,NaCl最大可耐受浓度为6%。D5-2在浓度为800mg/L对硫磷的培养液中生长良好,但对该农药的降解率仅为25%。为了提高降解作用,对菌株进行诱变复壮实验,结果显示:紫外诱变后降解率为49.1%,盐酸羟胺化学诱变后降解率为69.6%,土壤浸出液复壮后降解率为53.9%。确定在各种诱变方法中的最佳条件为:紫外灯垂直距离30cm辐照10s;0.8%盐酸羟胺溶液振荡反应30min;60%土壤浸出液振荡培养48h。在最佳条件下进行复合诱变,对硫磷的降解率得到大幅提高,可以达到82.8%。进一步研究该菌株对模拟对硫磷农药污染土壤的降解效果,结果表明:在对硫磷浓度为100mg/kg的土壤中,该菌株对对硫磷农药7d的降解率达到了66.7%,显示出其较好的应用前景。另外,本研究摸索出一种紫外分光光度法检测有机磷农药降解作用的方法,与文献报道的紫外检测方法相比,检测结果更为简便、精确,与气相色谱法检测结果拟合较好,具有一定的实际应用价值。
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