宫颈癌（cervical cancer）是最常见的妇科恶性肿瘤之一,每年全世界约有470,000新的宫颈癌患者被确诊,其中约230,000患者死于宫颈癌,而且呈年轻化的趋势。尽管采用手术、化疗以及放射性疗法能够起到一定的作用,但仍有部分患者复发或转移,因此越来越多的研究者认为,应该从肿瘤的生物学特性出发,深入研究肿瘤的生物治疗,尤其是肿瘤的免疫治疗。树突状细胞（dendritic cell）被认为是体内功能最强大的抗原提呈细胞,其能够诱导产生细胞毒性T淋巴细胞,特异性地杀伤肿瘤细胞,因此在肿瘤的临床免疫治疗中发挥重要作用。本研究拟采用带有HPV16 E6/E7基因的重组腺病毒载体（pAd-E6/E7）感染小鼠未成熟树突状细胞,制备树突状细胞疫苗,观察其所诱导的CTLs所致CaSki细胞凋亡及其对CaSki细胞的杀伤作用,为研究宫颈癌的免疫治疗提供依据,本实验从以下两个方面展开:（1）树突状细胞疫苗的制备:提取小鼠骨髓细胞,加入rmGM-CSF与rmIL-4,诱导骨髓细胞分化成未成熟树突状细胞,在相差显微镜下观察到未成熟树突状细胞呈大量集落、半贴壁状态出现,同时采用流式细胞术鉴定,树突状细胞相对特异性表面标志物CD11_C为71.19%呈高水平表达,而其他相对特异性表面标志物CD₄₀、CD₈₆和MHCⅡ分别为34.5%、39.53%和55.35%,呈低水平表达,符合未成熟树突状细胞表面标志物特征。用带有HPV16 E6/E7基因的重组腺病毒载体感染小鼠骨髓源树突状细胞24h后,在相差显微镜下观察到树突状细胞呈形态不同、大小不一的树突状、毛刺状突起,在激光共聚焦显微镜下有绿色荧光和部分树突状突起出现。取感染36h的树突状细胞,流式细胞术检测其表面标志物CD11_C、CD₄₀、CD₈₆和MHCⅡ分别为62.87%、55.5%、78.51%、95.95%,均呈高水平表达,符合成熟树突状细胞表面标志物特征。Western blot检测显示树突状细胞疫苗中有E6蛋白表达。（2）树突状细胞疫苗诱导CTLs杀伤CaSki细胞:树突状细胞疫苗与淋巴细胞共培养诱导出CTLs,作为效应细胞与CaSki细胞共培养,然后用PBS将CTLs轻轻洗去, TUNEL检测发现细胞凋亡,流式细胞术检测约72.82% CaSki细胞出现凋亡,而对照组无明显变化。为比较基因修饰的树突状细胞疫苗与肿瘤细胞裂解物负载的树突状细胞疫苗诱导的CTLs杀伤肿瘤细胞效应的优劣,我们分别将带有HPV16 E6/E7基因的重组腺病毒感染的树突状细胞疫苗和CaSki细胞裂解物负载的树突状细胞疫苗与淋巴细胞共培养诱导出CTLs,采用CCK8检测,发现带有HPV16 E6/E7基因的重组腺病毒载体感染的树突状细胞疫苗杀伤CaSki细胞明显优于CaSki细胞裂解物负载的树突状细胞疫苗,具有较好的临床应用前景。