【摘 要】
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【目的】：构建GV142-BNIP3真核表达载体并转染骨肉瘤MG-63细胞，观察BNIP3基因过表达对人骨肉瘤MG-63细胞增殖活性及凋亡的影响。【方法】：以脂质体LipofectamineTM2000介导的方
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【目的】：构建GV142-BNIP3真核表达载体并转染骨肉瘤MG-63细胞，观察BNIP3基因过表达对人骨肉瘤MG-63细胞增殖活性及凋亡的影响。【方法】：以脂质体LipofectamineTM2000介导的方法将含BNIP3全长基因的真核表达质粒GV142-BNIP3转染入MG-63细胞中，用RT-PCR和Westernblot法检测BNIP3的mRNA和蛋白的表达。CCK-8法检测目的基因转染后细胞的增殖情况,流式细胞仪检测周期和细胞凋亡。【结果】：BNIP3-GV142真核表达载体构建成功并成功转染骨肉瘤MG-63细胞，在48小时后用RT-PCR和Westernblot法检测到BNIP3的mRNA和蛋白表达明显增高（P＜0.05）。CCK-8检测结果显示实验组MG-63细胞增殖力较对照组和空白组降低，差异有统计学意义(P<0．05)。细胞周期分析结果显示转染重组质粒组与转染空质粒组比，G0/G1期有明显减少，S期和G2/M期之和的平均值明显增加，P＜0.05，存在S期阻滞。流式细胞仪检测结果显示实验组细胞凋亡较对照组和空白组增加(P<0．05)。【结论】：BNIP3基因过表达可抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖活性，促进其凋亡，BNIP3基因可能成为肿瘤治疗的新靶点。
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