艾灸治疗UC的临床疗效及其对UC大鼠LPS/TLR4信号通路的调节作用研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mcl8023
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目的:研究艾灸对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)治疗的临床疗效以及艾灸对UC大鼠血清中LPS、SIg A以及结肠黏膜LPS/TLR4信号通路的调节作用,阐释艾灸治疗UC的作用机制。方法:第一部分:采用随机、对照、单盲设计,将128例UC患者随机分为艾灸组64例和假艾灸组64例。取气海穴、双侧天枢穴、双侧上巨虚穴对艾灸组患者施行隔药灸,对假艾灸组患者施行假隔药灸,每周3次,共治疗12周。分别于治疗前和治疗12周后采集两组患者的CRF表数据。分别比较两组患者的临床有效率、临床症状体征量表、改良的Mayo活动指数、Baron内镜评分、IBDQ炎症性肠病问卷、VAS腹痛评分以及HADS医院焦虑抑郁量表,从而观察艾灸治疗UC的临床疗效。第二部分:将雄性SD大鼠随机分为正常组(HC)、模型组(UC)、艾灸组(UC+HM)和西药组(UC+W)。除HC组外其它三组建立葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)诱导的大鼠UC模型。HC组和UC组不采取任何干预;UC+HM组大鼠取双侧天枢穴、上巨虚穴,采用隔药灸干预,每次每穴灸2壮,每日1次,连续灸7天。UC+W组以美沙拉嗪肠溶片溶液灌胃,每天2次,连续7天。采用HE染色观察大鼠的结肠组织病理学的改变;采用ELISA法观察隔药灸对大鼠血清中LPS和SIg A含量的影响;采用免疫组化法观察隔药灸对大鼠肠道LPS/TLR4通路及下游蛋白表达的影响;采用RT-PCR技术观察隔药灸对大鼠肠道LPS/TLR4通路下游炎症因子m RNA表达的影响。结果:第一部分:1.主要疗效指标临床总有效率:经过治疗后,艾灸组的总有效率为89.1%,假艾灸组的总有效率为61.1%,艾灸组临床总效率明显高于假艾灸组,差异有统计学意义(P<0.01)。2.次要疗效指标(1)中医临床症状积分:与治疗前相比,两组UC患者治疗后的腹痛、腹泻、黏液脓血便、形寒肢冷等中医临床症状积分明显降低(均P<0.01),两组组间比较,艾灸组临床症状积分的改善值显著优于假艾灸组(P<0.01)。(2)改良的Mayo活动指数:与治疗前相比,两组UC患者治疗后改良的Mayo评分明显降低(均P<0.01),两组组间比较,艾灸组改良的Mayo评分的改善值显著优于假艾灸组(P<0.01)。(3)Baron内镜评分:与治疗前相比,两组UC患者治疗后Baron内镜评分明显降低(均P<0.01),两组组间比较,艾灸组Baron内镜评分的改善值优于假艾灸组(P<0.05)。(4)IBDQ评分:与治疗前相比,两组UC患者治疗后IBDQ评分明显降低(P<0.01),两组组间比较,艾灸组IBDQ评分的改善值优于假艾灸组(P<0.05)。(5)腹痛VAS评分:与治疗前相比,两组UC患者治疗后腹痛VAS评分明显降低(均P<0.01),两组组间比较,两组患者腹痛VAS评分的改善值无明显差异(P>0.05)。(6)HADS评分:与治疗前相比,艾灸组和假艾灸组UC患者治疗后HADS-A评分降低(分别P<0.01,P<0.05),两组组间比较,艾灸组HADS-A评分的改善值显著优于假隔药灸组(P<0.01);与治疗前相比,艾灸组和假艾灸组UC患者治疗后HADS-D评分降低(分别P<0.01,P<0.05),两组组间比较,艾灸组腹痛HADS-D评分的改善值优于假隔药灸组(P<0.05)。第二部分:1.光学显微镜下观察可见:正常组(HC)大鼠结肠黏膜结构清晰完整,无病理变化;模型组(UC)大鼠结肠黏膜上皮缺损,结构紊乱,黏膜层及黏膜下层明显充血、水肿、溃疡及炎性细胞浸润;艾灸组(UC+HM)和西药组(UC+W)大鼠结肠黏膜可见愈合性溃疡,间质无明显充血水肿,伴少量炎性细胞浸润。与HC组比较,UC组、UC+HM组和UC+W组的结肠组织病理学评分均显著升高(P<0.01);与UC组比较,UC+HM组和UC+W组结肠组织病理学评分均显著降低(P<0.01)。2.与HC组相比,UC组大鼠外周血LPS、SIg A的含量明显升高(P<0.01);与UC组相比,UC+HM组和UC+W组大鼠外周血LPS、SIg A的含量均明显下降(P<0.01)。3.与HC组相比,UC组大鼠结肠黏膜SIg A表达降低(P<0.01),TNF-α、IL-6、LBP、CD14、TLR4、My D88、TRIF表达升高(P<0.01);与UC组相比,UC+HM和UC+W组大鼠结肠黏膜SIg A表达升高,而UC+HM组大鼠结肠黏膜的TNF-α、IL-6、LBP、CD14、TLR4、TRIF(P<0.01)以及My D88(P<0.05)表达降低,UC+W组TNF-α、IL-6、CD14、TLR4、My D88、TRIF(P<0.01)以及LBP(P<0.05)表达降低。4.与HC组相比,UC组大鼠结肠黏膜IL-10的m RNA表达降低(P<0.01),IL-6、IL-12、IL-17、IL-23、TNF-α、TNFR1、TNFR2的m RNA表达升高(P<0.01);与UC组相比,UC+HM组和UC+W组大鼠结肠黏膜IL-10的m RNA表达升高(分别P<0.01,P<0.05),UC+HM组大鼠结肠黏膜IL-6、IL-12、IL-17、IL-23、TNF-α、TNFR1(P<0.05)以及IL-10、TNFR2的m RNA表达降低(P<0.01),UC+W组大鼠结肠黏膜IL-17、IL-23、TNF-α(P<0.05)以及IL-6、TNFR1、TNFR2的m RNA表达降低(P<0.01)。结论:1.隔药灸配合西药治疗UC具有良好疗效,可改善UC患者的腹痛、腹泻和黏液脓血便等临床症状,减轻其焦虑抑郁情绪,提高UC患者的生活质量。2.隔药灸可调节UC大鼠外周血LPS、SIg A含量和结肠黏膜LPS/TLR4信号通路及下游炎症因子蛋白和m RNA表达,减轻其肠道炎症,该作用可能与艾灸对UC大鼠LPS/TLR4信号通路的调节有关。
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