通常情况下,分离小分子化合物是一般都采用单一模式的色谱,比如亲水作用色谱主要是用于分离强极性和亲水性强的小分子物质,反相色谱则主要用于分离非极性或极性较弱的物质。当分析组成成分性质不同的样品如药物、环境样品及生物样品时,单一模式的色谱并不能对这些样品进行有效的分离。此时,混合模式色谱就表现出了分离模式灵活,多样化等特点。酰胺柱是典型的亲水色谱柱,也是最常用的亲水色谱柱之一,对极性化合物是有较好的分离效果,在此基础上,我们制备了三种含有酰胺键混合模式色谱柱,并在亲水模式和疏水模式下对它们的色谱性质及分离能力进行了探究。本论文主要包括以下研究内容：1.制备了一种含有伯胺,叔胺以及亚胺多种类型氨基的固定相,利用红外光谱分析、元素分析及Zeta电势对其进行了表征,并研究了它的色谱行为。经研究发现,新合成的固定相同时具有亲水和疏水的特征。通过研究流动相水含量、pH、盐浓度及离子对试剂对测试化合物保留的影响,进一步了解了该固定相分别在高水相和高有机相的保留特点。五种核苷类化合物以及七种磺胺类化合物分别在新合成的多种类型氨基固定相上得到了较好的分离,此外,在分离含有苯胺、苯酚、硝基苯及苯甲酸这四类物质的混合样品中,可以排除前三类物质的干扰。2.分别制备了环胱氨酸固定相及半胱氨酸固定相,利用红外光谱及元素分析等对新合成的固定相进行了表征,通过Ellman反应对硅胶表面所键合的基团进行了定量测定。在亲水模式及疏水模式下,分别探究了流动相组成、pH以及盐浓度对物质保留的影响,深入了解了两种固定相在两种模式下的保留特点及在亲水模式下的保留机理并进行了对比。两种固定相在亲水模式下对七种苯甲酸类物质有较好的分离,五种磺胺类物质在亲水模式及疏水模式下也都获得了良好的分离。