论文部分内容阅读
目的:采用乙酸灌肠+捆绑束缚的方法制备腹泻型肠易激综合征的大鼠模型,运用隔药饼灸对腹泻型肠易激综合征大鼠进行干预治疗,探讨隔药饼灸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠组织中5-HT、5-HT3R、5-HT4R表达的影响。方法:SPF级60只雄性SD大鼠,适应性喂养一周,分为正常组(12只)、模型组(48只),模型组大鼠予以乙酸灌肠7天后行束缚应激2周,验证模型成功后将大鼠随机分为模型组、温和灸组、隔药饼灸组和西药组,每组12只。正常组不予以任何干预,模型组予生理盐水灌胃;其余分别予温和灸、隔药饼灸、西药灌胃治疗,2周后观察大鼠一般行为学变化;粪便观察指标变化;内脏敏感性评分;HE染色观察结肠组织病理学变化;Elisa法检测结肠组织中5-HT表达,Western blot法检测结肠组织中5-HT3R、5-HT4R的表达。结果:1.大鼠一般行为学变化:正常组大鼠精神状态好,活波好动,皮毛有光泽,体重增长较快。模型组大鼠精神萎靡,活动度差,反应迟缓,皮毛缺乏光泽,常蜷缩于笼子角落,体重增长缓慢。与模型组相比,温和灸组、隔药饼灸组、西药组大鼠精神、活动度、皮毛光泽度、体重增长量均有改善。2.粪便观察指标:正常组大鼠肛门处干净,粪便成型,粪便性状评分,模型组大鼠粪便变软或不成形,肛门处多有粪便粘附,粪便性状评分明显增加(P<0.01);温和灸组、隔药饼灸组、西药组大鼠大便成型,较柔软,粪便性状评分明显降低(P<0.01)。3.内脏敏感性的评分:与正常组比较,模型组大鼠AWR评分为3时(腹背部肌肉较强烈收缩并把腹部抬离地面)的注水量较低,这与模型组大鼠的内脏敏感性升高有关,而经过温和灸、隔药饼灸、匹维溴铵灌胃的干预后,注水量上升,说明隔药饼灸和匹维溴铵对IBS-D大鼠内脏高敏感状态有较好的良性调整作用。4.结肠组织病理学检测:各组HE染色结果结肠组织结构正常,黏膜上皮完整,无明显充血水肿和溃疡,无炎症细胞浸润等病理组织学改变。5.指标检测:与正常组相比,模型组结肠组织中5-HT、5-HT3R、5-HT4R都有不同程度的变化,5-HT表达量上升(P<0.01),5-HT3R的表达量上升(P<0.05),5-HT4R的表达量下降(P<0.05);温和灸、隔药饼灸、西药治疗模型组后,5-HT的表达量下降(p<0.01)、5-HT3R的表达量降低(P<0.05)、5-HT4R的表达量升高(P<0.05)。结论:1.采用乙酸灌肠联合捆绑束缚刺激大鼠,干预3周,可成功复制IBS-D大鼠模型;2.模型组大鼠结肠组织中5-HT、5-HT3R、5-HT4R表达均有明显不同程度变化,说明5-HT、5-HT3R、5-HT4R与IBS-D发病有关;3.隔药饼灸对乙酸灌肠联合束缚应激刺激制备的IBS-D大鼠模型的腹泻症状和内脏高敏感性状态具有良性的调节作用;可以影响调节大鼠结肠组织中5-HT、5-HT3R、5-HT4R蛋白含量的表达。