论文部分内容阅读
目的：通过观察Fas抗体、白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的气道上皮细胞凋亡、增殖的影响，探讨炎症状态下气道上皮细胞凋亡、增殖的变化规律及可能对气道炎症和气道重塑的作用。方法：分离兔的气道上皮细胞，在体外培养的过程中，加入白细胞介素-1β与不同浓度的Fas抗体共同孵育，以流式细胞术Annexin V-FITC、PI染色法和TUNEL法检测气道上皮细胞凋亡率的变化，以免疫细胞化学方法检测气道上皮细胞增殖细胞核抗原（PCNA）的表达程度。结果：(1)加入不同浓度的Fas抗体作用24小时，随Fas抗体浓度的增加（100，500，1000ng /ml），气道上皮细胞的凋亡率逐渐增加[分别为（3.74±0.267）%，（6.97±0.131）%，（8.76±0.261）%]，与对照组凋亡率[（2.46±0.272）%]比较，500，1000ng/ml组差异有显著性（P﹤0.05）；在IL-1β存在的炎性条件下，加入Fas抗体作用24小时，随Fas抗体浓度的增加（100，500，1000ng/ml），气道上皮细胞的凋亡率逐渐增加[分别为（4.04±0.070）%，（6.08±0.150）%，（7.98±0.061）%]，与对照组凋亡率[（2.63±0.245）%]比较，500，1000ng/ml组差异有显著性（P﹤0.05），加IL-1β组与不加IL-1β组间差异无显著性；(2)Fas抗体(500 ng/ml)分别作用12，24，36小时，气道上皮细胞的凋亡率逐渐增加[分别为（4.85±0.221）%，（7.24±0.673）%，（11.86±0.266）%]，与同时间点对照组凋亡率[（1.96±0.309）%，（2.81±0.287）%，（5.43±0.438）%]比较，差异有显著性（P均﹤0.05）；(3)以TUNEL方法检测气道上皮细胞的凋亡率，分别加入不同浓度Fas抗体（500，1000 ng/ml）作用24小时，其凋亡率分别为[（8.91±0.249）%，（12.24±0.610）%]，与对照组[（3.07±0.386）%]比较，差异有显著性（P﹤0.05），在存在IL-1β的条件下，Fas抗体(500 ng/ml)组凋亡率为[（10.94±0.270）%]，与对照组[（3.07±0.386）%]比较，差异有显著性（P﹤0.05），加IL-1β与不加IL-1β组间差异无显著性；(4)加入不同浓度Fas抗体（500，1000 ng/ml）作用24小时，以免疫<WP=5>细胞化学方法观察，随Fas抗体浓度增加，PCNA表达阳性率逐渐增高，分别为[（49.66±6.714）%，（57.03±1.923）%]，IL-1β组和IL-1β+Fas抗体(500 ng/ml)组 PCNA表达阳性率为[（72.21±5.904）%，（44.57±7.959）%]，以上各实验组与对照组表达阳性率[（36.50±2.106）%]比较，差异均有显著性（P﹤0.05），各加Fas抗体组与单加IL-1β组比较，差异均有显著性（P﹤0.05）。结论：Fas抗体能够有效的诱导正常和炎症状态下原代气道上皮细胞发生凋亡，IL-1β能有效的增强气道上皮细胞的增殖作用，但其促细胞凋亡的作用不明显，Fas抗体可以有效抑制IL-1β所致气道上皮细胞的增殖作用，可能对抑制气道炎症和气道重塑有积极作用。