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岩黄连为罂粟科紫堇属植物,生物碱是其主要的生理活性成分,临床上主要用于急慢性肝炎属肝胆湿热证者。从岩黄连总碱中已分离得到多种原小檗碱型生物碱和四氢原小檗碱型生物碱,其中脱氢卡维汀为其主要成分,其结构与小檗碱相似。已有报道,小檗碱能降低大鼠血清中脂质水平而四氢小檗碱类则在抗氧化上有一定的疗效,但是尚未有明确报道岩黄连总生物碱提取物在降血脂以及抗氧化方面的作用。本文通过构建饮食性高脂血症大鼠模型,研究探讨了岩黄连总生物碱提取物的体内降血脂以及抗氧化的作用,并且采用体外1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除反应评价了岩黄连总生物碱及其组分清除自由基的能力。主要研究内容包括以下3个方面:
⑴岩黄连总生物碱提取物的制备及含量测定:用60%乙醇水溶液回流提取岩黄连粗粉之后,再用大孔吸附树脂对岩黄连总生物碱粗提物进行纯化,得到精制的岩黄连总生物碱提取物,其中总生物碱含量为62.2~65.9%,脱氢卡维汀含量为9.3~10.5%。
⑵岩黄连提取物对高脂饮食大鼠的降血脂抗氧化作用研究:构建饮食性高脂血症大鼠模型,探讨岩黄连生物碱提取物在降血脂以及抗氧化方面的作用。80只雄性SD大鼠分为7组。其中空白组10只鼠给予基础饲料自由摄食,同时以10ml/(kg·bw)生理盐水灌胃,模型组15只鼠,高、中、低剂量岩黄连总生物碱提取物给药组各11只鼠,阳性药物辛伐他汀对照组和药物联用组各11只鼠,分别给与高脂饲料自由摄食,并予以10ml/(kg·bw)生理盐水,120mg/(kg·bw)、60mg/(kg·bw)、30 mg/(kg·bw)岩黄连总生物碱提取物溶液,10 mg/(kg·bw)辛伐他汀溶液及10ml/(kg·bw)联用药物溶液灌胃。结果发现,岩黄连总生物碱提取物在不影响大鼠正常生理状态下,能调节高脂饮食大鼠体内的血脂水平,能显著降低大鼠血浆TC,LDL—C的水平,并且对高脂饮食导致的肝脏脂肪性病变具有保护作用。而且岩黄连总生物碱提取物能使高脂饮食大鼠各器官(肝脏、心脏、脑组织、肾脏及血清)的总抗氧化能力水平升高,MDA含量降低,SOD以及GSH—Px活性增加,从而达到抗氧化作用效果。
⑶岩黄连总生物碱及其成分对自由基的清除活性:实验以DPPH自由基清除反应评价岩黄连生物碱及其成分对自由基的清除作用。岩黄连总生物碱有一定的清除自由基能力,当浓度大于200μg/ml,其活性与维生素C相当。五个生物碱成分清除自由基能力由大到小依次为去氢分离木瓣树胺>脱氢卡维汀>去氢碎叶紫堇碱>四氢黄连碱>卡维汀,其中去氢分离木瓣树胺清除自由基能力甚至优于维生素C。