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目的 在LightCycler PCR仪上对多药耐药基因(mdr1)定量测定的方法和临床应用进行探讨，通过对耐药／非耐药急淋患者差异表达基因的筛选来探索多药耐药的分子病理机制，并对部分功能明确的基因在耐药中的作用进行验证。 方法 在LightCycler PCR仪上建立了荧光定量逆转录-多聚酶链反应检测多药耐药基因(mdr1)的技术方法，并应用该方法检测了30例急性白血病患者和8例正常人外周血mdr1基因的表达。根据mdr1基因表达水平并结合临床将6例急淋分为耐药组和非耐药组，每组各3人，用含有4096个人类已知基因的cDNA表达谱芯片检测两组之间差异表达的基因，并选择其中高表达的细胞周期蛋白B1基因，根据Genbank中所查人细胞周期蛋白B1和β-actin基因组序列，分别设计两对引物，应用半定量逆转录-多聚酶链反应检测了14例耐药急性白血病患者和13例非耐药急性白血病患者外周血细胞周期蛋白B1基因的表达水平。 结果 利用荧光定量逆转录-多聚酶链反应检测mdr1的实验方法标准曲线线性良好(r=1.0)，耐药组mdr1基因拷贝数与非耐药组有显著性差异(p〈0.01〉，正常人亦有低水平mdr1基因的表达。基因芯片两次重复检测显示耐药组较之非耐药组共出现了150个差异表达基因，其中有83个基因低表达，67个基因高表达，这些差异表达的基因涉及到生命活动的诸多方面，如细胞生长、细胞周期、细胞凋亡、离子转运、细胞间信息传导等。RT-PCR半定量结果显示耐药组与非耐药组相比，细胞周期蛋白B1基因表达水平有显著性升高。 结论 荧光逆转录．多聚酶链反应是一种可靠的定量方法，能快速、特异地检测肿瘤标本中的mdr1，为临床化疗用药、预防MDR发生、考核逆转MDR效果等提供了有价值的量化指标；采用cDNA芯片有助于平行、高通量地筛选细胞多药耐药相关基因，可为多药耐药的分子病理机制研究提供新的手段；细胞周期、细胞凋亡相关基因表达异常可能是多药耐药的分子病理机制之一，细胞周期蛋白B1基因可作为判断AL患者耐药的指标，对判断AL的预后具有一定的价值。