基于纳米通道的蛋白质分子输运特性实验研究

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人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)旨在解决包括肿瘤在内的人类疾病的分子遗传学问题,通过对组成人类DNA的3亿多个碱基对的全序列分析,人类众多遗传疾病的致病机理有望得到彻底阐明,这将大大提高人类的生活水平。在快速、低成本DNA测序领域,纳米通道技术是最有前途的方法之一,因此研究纳米通道的制作技术,以及其在生物分子检测方面的应用,意义重大。   本文以聚碳酸酯超滤膜为基板,用化学镀的方法在超滤膜上沉积金,制得直径在45nm左右的金纳米通道阵列,利用制得的金纳米通道阵列搭建离子电流测量平台,实现了对羊抗人IgG分子的浓度检测。当羊抗人IgG分子通过直径45nm的金纳米通道时,由于物理占位及表面电荷的影响,会引起离子电流发生变化;在KCI浓度为0.15mol/L(pH=7.48)溶液中,IgG分子的物理占位对离子电流有阻塞作用,会导致电流减小,IgG浓度在1.8~18ng/mL范围内,减小量与浓度成线性关系;实现了对IgG的定量检测。KC1浓度降低到0.025mol/L时,由于IgG分子扩散层内反离子对通道内离子浓度的贡献占主导地位,从而造成离子电流随着IgG浓度增大而增大。   本文利用拉伸玻璃管的方法制作出了单孔纳米通道,这是一种制作纳米通道的新方法,该方法操作简单,成本很低,适合在一般条件的实验室中操作。利用搭建的测量微小电流的膜片钳实验平台,测量了纳米通道的直径,结果表明制作的纳米通道的直径可以达到70nm以下。利用制作的纳米通道对羊抗人IgG分子的迁移特性进行了研究,结果表明:当电解质浓度较低时,lgG分子通过纳米通道时,电流有变大的跳跃;当电解质浓度较高时,IgG分子通过纳米通道时,电流有变小的跳跃,这与理论预测一致。
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