发热患者中斑点热群立克次体感染诊断的临床研究

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目的:使用血涂片、间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)、巢氏聚合酶链式反应(Nested Polymerase Chain Reaction,Nested-PCR)方法对发热时间大于1周患者进行筛查检测,了解斑点热群立克次体在发热人群中的感染情况,并在此基础上,总结所观察病例临床特点及转归等,希望能够警示临床医务人员对此类疾病的认识,提高诊断率,及时治疗,减少流行爆发,降低病死率。方法:按标准纳入2015年3月至2017年1月首都医科大学附属北京友谊医院和北京朝阳医院住院的原因不明确,持续发热≥1周,体温大于38℃的患者,于入院第1天、第14天抽血,留取血清及全血标本。采用吉姆萨染色方法处理血涂片标本,镜下观察寻找细胞内包涵体;IFA检测患者血清中斑点热群立克次体IgM和IgG抗体;Nested-PCR方法扩增立克次体外膜蛋白A(Outer membrane protein A,OmpA)基因。按照IFA结果阳性与否分组,完成病例观察表,分析总结病例特点。结果:第一部分:241例发热者按照入组标准纳入。IFA检测IgM或IgG抗体滴度>64阳性率17.0%(41/241)。该41例患者中有68.3%(28/41)患者14天后出现抗体滴度升高或者阴性转为阳性,提示现症感染可能。Nested-PCR检测结果显示,1例患者核酸扩增349bp外膜蛋白A(Outer membrane protein A,OmpA)基因片段,Blast比对结果显示,该基因片段碱基序列与西伯利亚立克次体亚种BJ-90(GenBank号AF179365)完全一致,该患者IFA抗体检测同时阳性。所有患者血涂片均未见斑点热群立克次体包涵体。第二部分:IFA检测斑点热群立克次体IgM或IgG抗体阳性的患者来自北京、河南、黑龙江、江西、内蒙古、浙江,与斑点热群立克次体分布一致,这些阳性患者除发热外,可有其他非典型症状,包括畏寒或寒战、头痛、头晕、乏力、肌痛,部分患者出现淋巴结肿大,以颈部和腹股沟及腋窝淋巴结肿大为主,2例患者可见蜱虫叮咬部位焦痂,5例患者出现典型皮疹。经经验性给予四环素类药物治疗,31.7%(13/41)体温可于24小时内降至正常。统计分析显示IFA阳性患者血常规及生化化验指标与IFA阴性患者比较无显著差异。IFA检测斑点热群立克次体感染阳性率与PCR检测结果一致性较差。结论:1.发热人群中存在斑点热群立克次体现症感染病例。2.对于立克次体IgM或者IgG抗体阳性患者,经排除支原体、衣原体等其他感染,给予四环素类药物治疗有利于提高治愈率。
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