欧李又称钙果,为蔷薇科樱桃属的小灌木果树。欧李根系发达,适应性强,对寒冷、干旱以及盐碱环境具有较强的耐受性,并且耐瘠薄,具有良好的生态作用。本试验以欧李‘农大6号’为材料通过叶片直接诱导产生不定芽的方法建立了欧李的再生体系。此外,欧李对低温具有较强的的耐受性,结合前人的研究,对欧李抗寒基因CBF进行克隆和表达分析,并在拟南芥中异源表达鉴定该基因的功能。本研究成功建立了欧李的再生体系,为后续种质资源改良以及通过基因工程的种质创新奠定基础,同时对ChCBF1基因功能进行了初步分析,主要结果如下:1、通过叶片直接诱导不定芽建立了欧李‘农大6号’的再生体系:（1）适宜初代培养培养基配方为:MS+琼脂（7 g/L）+蔗糖（30 g/L）+6-BA（1.0mg/L）+NAA（0.5 mg/L）。（2）通过叶片直接诱导形成不定芽的适宜培养基为:1/2 MS+琼脂（7 g/L）+蔗糖（30 g/L）+IAA（0.1 mg/L）+NAA（0.05 mg/L）+6-BA（0.8 mg/L）+Ag NO3（0.2 mg/L）,诱导率为50.22%。通过多次重复验证,诱导率表现稳定。（3）适宜不定芽增殖的培养基配方为:MS+琼脂（7 g/L）+蔗糖（30 g/L）+6-BA（0.6 mg/L）+NAA（0.1 mg/L）。（4）适宜不定芽生根的培养基配方为:1/2 MS+琼脂（7 g/L）+蔗糖（30 g/L）+IAA（1.2 mg/L）。2、ChCBF1基因的克隆及表达分析利用PCR技术克隆得到一个编码229个氨基酸的长度为690 bp的DNA片段,命名为ChCBF1基因。该基因与拟南芥的CBF1基因同源。多序列比对分析表明其含有典型的AP2结构域。启动子分析表明,该基因的表达可能受到环境以及激素等因素调控。表达分析显示该基因在低温下诱导表达。3、ChCBF1基因的功能验证构建35S-ChCBF1植物过表达载体转化欧李和拟南芥,欧李未转化成功。对拟南芥幼苗进行低温胁迫处理,对叶片中MDA含量、脯氨酸含量以及SOD活性进行测定。结果表明,ChCBF1基因在拟南芥中的过表达提高了拟南芥对低温的耐受性,主要表现在,转基因植物的细胞膜受损程度显著低于对照,体内有助于抵抗低温伤害的脯氨酸含量和SOD活性显著高于对照。综上,欧李的再生体系已经建立,明确了欧李成为果树遗传转化模式树种的潜力。通过ChCBF1基因的异源转化进一步验证了欧李抗寒性来自于相关基因的调控。