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碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein, ChREBP)是糖、脂代谢过程中重要的转录因子,在调节哺乳动物体内糖、脂代谢方面起到重要作用。有关肝脏的相关研究表明,葡萄糖和胰岛素可以调节ChREBP的表达。在糖尿病情况下,异常的葡萄糖和胰岛素有可能通过调节ChREBP的活性造成肾脏糖、脂代谢紊乱,使肾脏纤维化和肾功能受损。本实验观察ChREBP在1型糖尿病小鼠肾脏组织的表达及胰岛素治疗对其表达的影响,从而有助于进一步探讨ChREBP在糖尿病肾脏糖、脂代谢紊乱中的作用。目的：通过动物实验和体外细胞培养观察ChREBP在小鼠肾脏中的分布及葡萄糖和胰岛素对其表达的影响。方法：1.动物实验：1)10周龄的雄性C57BL/6野生型小鼠共30只,随机分成三组,对照组10只；其余小鼠予腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50mg/kg/day)5天,制备1型糖尿病小鼠模型,未予治疗的小鼠为糖尿病组；其余小鼠予皮下注射长效胰岛素来得时(2-10 units/Kg/day)30天,为治疗组；2)利用免疫组织化学染色法检测肾脏ChREBP的分布,利用免疫印记法和实时PCR法检测ChREBP在三组小鼠肾脏中的表达变化；2.细胞实验：原代培养小鼠肾脏近曲小管上皮细胞,分别予以0.1u/ml的胰岛素和不同浓度的葡萄糖(11mmol/L、20mmol/L、25mmol/L)刺激,利用免疫印记法检测ChREBP的表达变化。结果：1.动物实验：1)糖尿病小鼠造模成功,使用胰岛素治疗有效。与对照组相比,糖尿病组小鼠血中甘油三酯和胆固醇浓度明显升高(p<0.01)；而治疗后小鼠血中甘油三酯和胆固醇含量明显降低(p<0.05)。2)免疫组化结果显示,ChREBP主要表达在肾小管,而肾小球表达较少,且糖尿病组ChREBP表达水平较对照组明显减少,而治疗组ChREBP表达有所升高。3)在糖尿病组小鼠肾脏中,ChREBP总蛋白水平较对照组下降57%(P<0.05),mRNA水平较对照组下降约39%(P<0.01)；与糖尿病组相比,治疗组中ChREBP总蛋白水平上调21%(P<0.05),mRNA表达水平上调9%(P<0.05)。2.细胞实验：与11mmol/L的葡萄糖相比,25mmol/L的葡萄糖可使肾小管上皮细胞ChREBP表达上调28%(p<0.01)。胰岛素则可使上述浓度葡萄糖刺激的肾小管上皮细胞ChREBP表达分别上调18%、17%(P<0.01)。结论：1型糖尿病小鼠较正常小鼠肾组织中ChREBP表达降低,葡萄糖和胰岛素可影响肾脏ChREBP的表达水平。ChREBP可能参与了肾脏的糖、脂代谢过程。