【摘 要】
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岩溶生态系统是重要的陆地碳汇之一,岩溶作用对大气CO2具有显著的回收效应。已有研究表明微生物及其碳酸酐酶对岩溶作用具有显著促进作用。碳酸酐酶(Carbonic anhydrase,EC4.2.
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岩溶生态系统是重要的陆地碳汇之一,岩溶作用对大气CO2具有显著的回收效应。已有研究表明微生物及其碳酸酐酶对岩溶作用具有显著促进作用。碳酸酐酶(Carbonic anhydrase,EC4.2.1.1)是一种含锌的金属酶,能催化CO2和HCO3-的相互转换反应。本文以桂林丫吉岩溶试验场为例,并以思赖碎屑岩区为对照,研究了典型岩溶生态系统土壤中CA活性及细菌多样性的时空特征,并初步探讨了土壤细菌多样性与土壤CA活性的关系,同时,对产胞外CA的典型细菌进行了γ-CA基因的克隆与表达研究。本文结果为深入研究微生物及其CA在岩溶碳汇中的作用提供了一定的科学依据,并为进一步应用发酵工程与酶工程技术获取大量微生物CA进行固碳增汇研究奠定了基础。本文获得的主要结果如下:(1)岩溶试验场土壤CA活性一般高于思赖碎屑岩区,且岩溶试验场不同地貌部位土壤CA活性存在明显差异,一般随土壤深度增加而降低。土壤CA活性的季节变化规律一般是春季上升、夏季最高、秋冬季较低。(2)各样地土壤细菌多样性指数在2.573.91之间,UPGMA聚类分析表明土壤细菌多样性受地貌部位和季节的影响,岩溶试验场同一地貌部位,土壤细菌群落组成最相似。(3)土壤细菌多样性与土壤CA活性具有一定的相关性,且相关性受季节的影响。(4)克隆了产胞外CA的典型细菌的γ-CA基因,该基因片段长度为513bp,分子量为18.84kDa,等电点为6.42,分子结构模型预测该酶定位于细胞外,是一个具有左手平行β折叠结构域(LBH)的三聚体酶。通过构建PET-32a(+)RZγCA重组质粒,经原核表达后,γ-CA活性为21.08U/g湿菌体。
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