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目的研究高浓度的肿瘤坏死因子α(TNF-α)对牙髓干细胞(DPSCs)成骨分化能力的影响及其机制。方法体外分离、培养DPSCs。在成骨分化培养基中诱导DPSCs成骨分化,并且加入0、0.01、0.1、1、10、50、100 ng/mL TNF-α刺激。碱性磷酸酶及茜素红染色法比较其对DPSCs成骨分化的影响。在成骨分化培养基中加入高浓度TNF-α分别刺激3、5、7、14天,运用Western blot分析RAC1及成骨标记蛋白RUNX2、BMP2表达情况。运用免疫荧光和Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、GSK3β表达情况。干扰RAC1表达,运用碱性磷酸酶染色分析对DPSCs成骨分化的影响,运用Western blot分析干扰RAC1对成骨相关蛋白BMP2、RUNX2的表达以及Wnt/β-catenin信号通路激活的影响。结果0、0.01、0.1、1、10、50、100 ng/mL TNF-α刺激对DPSCs成骨分化的影响不同,低浓度的TNF-α(<10ng/mL)刺激会促进DPSCs成骨分化,高浓度的TNF-α(>50ng/mL)刺激会抑制DPSCs成骨分化,并且具有时间依赖性。在低浓度TNF-α刺激下RAC1表达变化无统计学意义,高浓度TNF-α刺激下RAC1表达增高,并且具有时间依赖性。高浓度TNF-α刺激,β-catenin入核增加,Wnt/β-catenin信号通路激活。干扰RAC1表达可以抑制β-catenin入核,逆转高浓度TNF-α介导的DPSCs成骨分化能力降低。结论我们的研究表明高浓度的TNF-α抑制DPSCs成骨分化,通过RAC1介导的Wnt/β-catenin信号通路的激活。增强炎症环境中DPSCs成骨分化能力,为DPSCs临床治疗炎症性骨疾病提供了理论依据。