抑制自噬对压力超负荷大鼠心肌肥厚以及心脏收缩功能的影响

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目的:研究及探讨抑制自噬对于压力超负荷大鼠心肌肥厚及心脏收缩功能的影响。方法:采用腹主动脉缩窄的方法制备压力超负荷大鼠模型。雄性SD大鼠26只,随机分为3组,分别为对照组、模型组、3-MA组,分别在4周、6周给予超声心动图检查,测量LVIDd、LVIDs、LVPWd、ISVd、FS、EF;6周后处死大鼠,采用联合生物酶消化法分离各组大鼠心肌细胞, MDC染色后荧光显微镜观察各组自噬情况;测量大鼠心脏重量指数(HW/BW)和左心室重量指数(LVW/BW即LVI);左心室组织切片HE染色了解心肌肥厚情况;TUNEL法检测左心室心肌细胞凋亡。结果: 1.3-MA组4周时FS与模型组及对照组相比均显著下降(P<0.05),而模型组与对照组之间无显著差别;模型组6周时FS较其4周时明显下降(P<0.05),且3-MA组及模型组6周时FS均较对照组明显下降(P<0.05);3-MA组4周时EF比模型组显著下降(P<0.05),模型组6周时比其4周时明显下降(P<0.05)。3-MA组及模型组4周、6周时LVPWd均较对照组有显著增厚(P<0.05),但两组之间无统计学差别。模型组6周时ISVd比对照组明显增厚(P<0.05),而3-MA组与对照组相比无差别。模型组及3-MA组LVI比对照组明显增大(P<0.05),而两组之间无差别。2.酶消化法可以分离出成年大鼠心肌细胞;MDC被心肌细胞吸收并选择性聚集于自噬溶酶体上,荧光显微镜观察时染上MDC荧光的自噬溶酶体呈深绿色或黄绿色点状结构,多分布于核周。对照组中,仅有很少量的MDC阳性细胞,而模型组中阳性细胞数明显增加,3-MA组中的阳性细胞数较模型组有所减少。模型组及3-MA组心肌细胞均显示有轻度心肌纤维变性。TUNEL法检测左心室心肌细胞凋亡结果为阴性。结论:1.压力超负荷可以诱导大鼠心肌细胞的自噬增强;2自噬参与到大鼠心肌收缩功能的代偿机制中。抑制自噬在早期可加剧心肌收缩功能的下降。在晚期有可能减缓大鼠心肌收缩功能的下降。3.抑制自噬有可能减轻压力超负荷心脏室间隔的肥厚。4.适度的自噬对机体有保护作用,持续的自噬可以诱导自噬性细胞死亡,从而加速机体的损害。
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