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长链非编码RNA（long non-codingRNA,lncRNA）可作为免疫调控因子参与疾病发生过程,特别是传染性疾病。鸡马立克氏病（Marek’s disease,MD）是马立克病毒（Marek’s disease virus,MDV）引起的高度传染性疾病,其免疫抑制导致了较高的发病率和死亡率,给养禽行业带来了巨大经济损失,目前对MDV致病机制及其引起的免疫抑制仍知之甚少。课题组前期研究发现,鸡lncRNA 53BP1和V-set免疫球蛋白结构域4（V-set and immunoglobulin domain-containing 4,VSIG4）在MDV感染鸡的脾脏组织中高表达,然而鸡lncRNA 53BP1是否通过调控VSIG4表达而参与MD的免疫调节仍旧未知。本研究拟通过鸡lncRNA 53BP1的功能获得性与功能缺失性验证试验,以及MDV过程中,鸡lncRNA 53BP1和免疫抑制相关因子mRNA表达水平的变化分析,明确MDV致病过程中鸡lncRNA 53BP1的免疫调控功能,对明确MDV致病机理和MD防控具有重大意义。本研究采用核质分离分别抽提细胞质与细胞核RNA,PCR鉴定lncRNA 53BP1在细胞内的分布情况,使用课题组前期构建的鸡lncRNA 53BP1过表达/干扰载体进行体外功能获得性及缺失性试验,通过CCK-8试验检测鸡lncRNA 53BP1过表达与干扰的DF-1细胞活性,通过q RT-PCR检测鸡lncRNA 53BP1过表达与干扰的DF-1细胞中lncRNA 53BP1、VSIG4、IL-2、IFN-γ的mRNA表达水平。试验共选用180只1日龄SPF雏鸡随机分为两组,MDV感染组每只雏鸡腹腔注射0.5 m L MDV BJ-1株血毒（2000 PFU/m L）,空白对照组注射等量的PBS（p H=7.4）,在感染后的第1、7、14、21、28、35、42天（Days post infection,dpi）采集脾脏组织,通过q RT-PCR检测鸡脾脏组织中lncRNA 53BP1、VSIG4、IL-2和IFN-γ的mRNA表达水平,分析其在MDV感染进程的动态变化趋势,以验证MDV致病过程中鸡lncRNA 53BP1的免疫调控功能。DF-1细胞核质分离试验结果表明鸡lncRNA 53BP1分布于细胞核与细胞质中。鸡lncRNA 53BP1体外功能获得性与功能缺失性试验结果表明:与鸡lncRNA 53BP1过表达对照组相比,鸡lncRNA 53BP1过表达的DF-1细胞中,VSIG4 mRNA表达水平极显著（p＜0.01）升高,IL-2、IFN-γmRNA表达水平极显著（p＜0.01）下降,DF-1细胞活性升高;与鸡lncRNA 53BP1干扰对照组相比,鸡lncRNA 53BP1干扰的DF-1细胞中,VSIG4 mRNA表达水平极显著（p＜0.01）降低,IL-2、IFN-γmRNA表达水平极显著（p＜0.01）升高,DF-1细胞活性下降。鸡lncRNA 53BP1功能的体内验证结果显示:与PBS对照组相比,MDV感染组中在1dpi-7dpi lncRNA 53BP1 mRNA表达水平无显著差异,14dpi-21dpi时其mRNA表达水平极显著（p＜0.01）降低,28dpi时其mRNA表达水平显著降低（p＜0.05）,35dpi-42dpi时其mRNA表达水平极显著（p＜0.01）升高;VSIG4 mRNA表达水平在1dpi-7dpi mRNA表达水平无显著差异,14dpi时其mRNA表达水平极显著（p＜0.01）降低,21dpi-42dpi时其mRNA表达水平极显著（p＜0.01）升高;IL-2 mRNA表达水平在1dpi时无显著差异,于7dpi时其mRNA表达水平极显著升高（p＜0.01）,14dpi时其mRNA表达水平显著（p＜0.05）升高,21dpi-42dpi时其mRNA表达水平极显著（p＜0.01）降低;IFN-γmRNA表达水平在1dpi与42dpi时mRNA表达水平无显著差异,于7dpi-14dpi时其mRNA表达水平极显著（p＜0.01）升高,21dpi-35dpi时其mRNA表达水平极显著（p＜0.01）降低。综上所述,鸡lncRNA 53BP1分布在细胞核与细胞质中,鸡lncRNA 53BP1通过在mRNA表达水平上影响lncRNA 53BP1、VSIG4和IL-2、IFN-γ的基因表达以及提高细胞的活性;在MDV感染过程中,lncRNA 53BP1与VSIG4等免疫调节因子的mRNA表达水平在随着MDV感染时间而呈现动态变化,lncRNA 53BP1与VSIG4的表达趋势相近,IL-2与IFN-γ的表达趋势较一致,参与影响MD的发生和发展。