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目的:在今天这个经济社会飞速发展的年代,肿瘤已经成为首要危害人类健康的疾病之一。乳腺癌是当今最普遍的女性恶性肿瘤,也是全世界妇女中主要的健康问题之一,乳腺癌患者主要死因是肿瘤的转移和复发。肿瘤发生侵袭转移是一个涉及多种信号通路、转录因子,多步骤,调控多个下游基因转录的复杂病理过程。越来越多的证据表明Erα-36与STAT3与肿瘤转移关系密切。探讨ER-α36与STAT3相互作用介导乳腺癌细胞迁移的新机制,对于预防和治疗乳腺癌具有重要意义。方法:分别构建ER-α36、STAT3、MMP2和MMP9的表达质粒,载体为pcDNA3.1,用IL-6处理细胞,在细胞均匀展开后做划痕实验和Transwell实验。通过构建含完整GAS序列的WT-MMP2/9-luc;含突变GAS序列的M1-MMP2/9-luc;截掉GAS序列的M2-MMP2/9-luc荧光素酶报告基因质粒,进行Luciferase检测以研究ER-α36和STAT3以何种机制影响MMP2/9的表达。过表达ER-α36和STAT3,ER-α36和STAT3在两种乳腺癌细胞中的共表达,使用ER-α36表达质粒上的抗体标记做ChIP实验,使用包含MMP2/9启动子GAS区域在内的引物检测共沉淀下来的基因序列。Western Blot检测STAT3和乙酰化磷酸化STAT3、MMP2、MMP9和p300等基因在蛋白水平上的表达,用实时定量荧光PCR来检测STAT3、MMP2和MMP9在RNA水平上的表达;用免疫荧光实验检测MMP2和MMP9在细胞中的定位情况。结果:根据上述实验方案,得到以下结果:IL-6诱导乳腺癌细胞MMP2和MMP9的表达,并对乳腺癌细胞迁移和侵袭有影响;STAT3介导IL-6诱导的MMP2和MMP9的表达及乳腺癌细胞迁移;ER-α36和STAT3介导IL-6诱导的MMP2和MMP9启动子活性;ER-α36与STAT3结合,影响STAT3磷酸化和乙酰化反应;STAT3磷酸化对IL-6诱导的MMP2和MMP9表达以及乳腺癌细胞迁移有影响;ERα-36招募p300并介导IL-6诱导的STAT3乙酰化;IL-6对胞核MMP2和MMP9转位的影响;ER-α36和JAK2-STAT3信号通路交叉性调控人乳腺癌细胞迁移。结论:通过实验研究,我们证明了ERα-36募集p300并介导了IL-6诱导的STAT3乙酰化。另外,ERα-36和STAT3结合MMP2和MMP9启动子并介导响应IL-6的MMP2和MMP9表达。MMP2和MMP9响应于IL-6从细胞质转移至细胞核。ERα-36和STAT3在人乳腺癌细胞迁移中的相互作用,为乳腺癌的研究进展提供了一种新方法和思路。