目的:以HPSE为靶向,化学合成siRNA转染大肠癌细胞株HT-29,观察瞬时转染特异性siRNA后人大肠癌细胞株HT-29 HPSE的表达,探讨RNA干扰HPSE对人大肠癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响。方法:以人大肠癌细胞株HT-29为研究对象,联合应用生物信息学技术与高效siRNA设计原则进行siRNA分子设计,并通过体外转录与化学合成siRNA,培养瞬时转染特异性siRNA,24、48、72小时后用MTT法检测实验组与对照组细胞的增殖活性,RT-PCR检测各组细胞HPSE mRNA表达水平,免疫组化细胞染色检测各组HPSE蛋白表达水平,Transwell体外侵袭实验进行癌细胞体外侵袭力分析。结果:siRNA组与对照组相比细胞增殖活性受到抑制(P<0.01),差异有显著性;而HPSE mRNA及蛋白表达siRNA组较对照组有显著下降;细胞侵袭能力实验组明显下降,差异显著(P<0.01);阴性对照组与空白对照组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:(1)沉默大肠癌细胞HPSE基因,对体外培养的大肠癌细胞的增殖和侵袭有明显的抑制作用;(2)沉默HPSE基因后大肠癌细胞的生物学行为的改变,与HPSE基因和蛋白表达下调有关。