核苷及其衍生物具有良好的抗病毒、抗肿瘤活性,己被广泛应用于临床,如何高效绿色合成核苷类药物一直是研究的重点。本文结合化学和生物方法,以1-氯-2-脱氧-3’,5’-二-O-对氯苯甲酰基-D-核糖为起始原料,采用结晶诱导不对称转化技术合成中间体2-脱氧--D-核糖-1-磷酸二环己胺盐,然后以该中间体和胸腺嘧啶为底物,利用含核苷磷酸化酶的大肠杆菌(Escherichiacoli)进行生物酶催化合成胸苷。结果表明,采用结晶诱导不对称转化的化学法合成2-脱氧-α-D-核糖-1-磷酸二环己胺盐收率达到84.9%,经HPLC测得其纯度为94.7%。产物经核磁共振氢谱和红外光谱鉴定,与文献相符。以其为底物,采用核苷磷酸化酶催化合成胸苷并优化其过程,得到最佳反应条件为:底物浓度为2-脱氧-α-D-核糖-1-磷酸二环己胺盐100 mmol/L,胸腺嘧啶400mmol/L;菌体量为80g/L;缓冲液pH8,反应温度55℃,反应时间4 h,转化率达到61.8%。最后,采用柱层析法对产物进行了分离,层析柱填料为硅胶(粒径为200～300目),洗脱剂组成为F(甲醇):V(二氯甲烷)=1:15,最终得到纯度较高的胸苷产品,经核磁共振氢谱和红外光谱鉴定,结构与目标产物一致,收率和纯度分别达到49.7%和95.3%,其熔点为184～186 ℃。通过化学-生物酶法的有效结合,有效解决了核苷合成中碰到的诸如原料来源缺乏、化学合成立体选择性差等问题,并减少了有毒试剂的使用,具有高选择、高效性、少污染的优点。该方法还可用于其它脱氧核苷的合成,对促进核苷的研究具有积极意义。