第一部分:甲状腺癌P<53>基因mRNA、P<53>基因蛋白表达;目的:研究甲状腺癌P<53>基因mRNA、P<53>基因蛋白表达.方法:应用原位杂交法和逆转录聚合酶链法观察了甲状腺癌P<53>基因mRNA的表达.运用免疫组织化学方法检测了甲状腺癌P<53>基因蛋白的表达.第二部分:甲状腺癌P<53>基因k-ras基因序列分析;目的:检测甲状腺癌P<53>基因外显子7,8,k-ras基因外显子1、2突变情况.方法:采用聚合酶链式反应—测序方法对14例甲状腺癌标本进行序列分析.第三部分:甲状腺癌P<53>基因甲基化状态分析;目的:探讨甲状腺癌P<53>基因甲基化状态.方法:应用限制性内切酶HpaⅡ和MspⅠ酶切甲状腺癌及癌旁组织DNA,通过聚合酶链反应扩增P<53>基因第5外显子,经琼脂糖凝胶电泳后,分析其电泳图谱.第四部分:甲状腺癌差异表达基因的筛选与克隆;目的:筛选、克隆在甲状腺癌组织与正常甲状腺组织之间差异表达的、可能对甲状腺癌的发生发展起作用的相关基因.方法:(1)应用抑制性消减杂交(SSH)的方法构建人甲状腺癌组织与正常甲状腺组织之间差异表达的cDNA消减文库,(2)克隆、鉴定甲状腺组织特异性表达的基因片段,通过生物信息学方法进行初步分析,(3)设计基因特异性引物,用5端和3端cDNA末端快速扩增法(RACE)进行全长基因序列扩增,(4)以RNA印迹实验(Northern Blot)验证30号序列在两种组织中的表达差异.