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本文主要从以下几方面展开论述：
第一部分 氧化应激对卵丘颗粒细胞线粒体功能及胚胎质量的影响
目的：探讨氧化应激对人卵丘颗粒细胞（cumulus granulosa cells,CGCs）线粒体功能及胚胎质量的影响。
方法：选择2018年11月至2019年5月在解放军第901医院生殖医学中心接受卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injectio，ICSI)助孕且卵巢储备功能正常（normal ovarian Reserve，NOR）的90例患者作为研究对象，收集所有卵母细胞的CGCs，根据取卵后第3天（D3)优质胚胎占比将研究对象为3组:a组（优胚占比＜1/3，n=27），b组（1/3≤优胚占比＜2/3，n=41），c组（优胚占比≥2/3，n=22）。荧光素酶法检测三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）含量，WST-8法检测总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD)活性，硫代巴比妥酸法检测丙二醛（malondialdehyde，MDA)含量，采用spearman秩和分析探讨SOD、MDA与ATP含量间的相关性，并比较各组间SOD、MDA与ATP水平的差异，评估其对胚胎质量的影响。
结果：1.CGCs中ATP含量与总SOD活性呈正相关（r=0.473，P=0.000＜0.05），与MDA含量呈负相关（数r=-0.674，P=0.000＜0.05）。
2.随胚胎质量的升高，ATP含量呈上升趋势，而总SOD活性则呈下降趋势，但三组间ATP、SOD及MDA含量差异均无统计学意义（P>0.05）。
结论：氧化应激可导致CGCs线粒体损伤，ATP含量降低；但与胚胎质量无明显相关性。
第二部分 卵丘颗粒细胞线粒体DNA损伤对胚胎质量的影响
目的：探讨人CGCs线粒体DNA（Mitochondrial DNA，mtDNA）损伤对胚胎质量的影响。
方法：1.选择2019年5月至2019年12月在解放军第901医院生殖医学中心接受ICSI助孕治疗且为NOR的60例患者作为研究对象，取卵日收集所有单个成熟卵母细胞即MⅡ期卵母细胞对应的CGCs，提取CGCs基因组DNA，实时荧光定量聚合酶链锁反应技术(Real-time Quantitative PCR,Q-PCR)检测CGCs的mtDNA相对拷贝数。根据CGCs对应的241枚D3胚胎累积评分（embryo cumulative score，ECS）分为A组（ECS＜10，n=61）、B组（10≤ECS≤30，n=117）和C组（ECS＞30，n=63），分析CGCs的mtDNA拷贝数与胚胎质量的关系。
2.上述60例患者各取一份CGCs DNA溶液，普通PCR扩增后采用Sanger测序技术检测mtDNA D-Loop区突变，按其对应的60枚胚胎ECS评分分组为上A、B、C三组，分析CGCs mtDNA D-Loop区位点突变数与胚胎质量的关系。
结果：1.随胚胎评分的增加mtDNA拷贝数呈递增趋势，其中A组mtDNA拷贝数是C组的0.71±0.33，差异有统计学意义（P＜0.05）。
2.随胚胎评分的增加D-loop区突变数呈递减趋势，A组(4.86±2.23)显著高于B组(3.42±2.10)和C组（3.29±1.33)（P＜0.05）。60例患者共检出D-loop区80个变异位点,总突变数为235个，其中42个为新发现的突变，点突变167个占71.06%，缺失突变40个占17.02%，插入突变28个占11.91%；出现频率≥5次的高变位点10个，分别为nt.175delA、nt.326InA、nt.329G-A、nt.16443T-C、nt.16444C-T、nt.16448T-C、nt.16255G-T、nt.16324T-C、nt.16442C-T、nt.16447InC。HVRⅠ区突变34个，HVRⅡ区突变114个，HVRⅢ区突变4个，周边区突变83个。
结论：CGCs的mtDNA拷贝数减少及D-loop区变异位点增加均对胚胎质量有负面影响。
第一部分 氧化应激对卵丘颗粒细胞线粒体功能及胚胎质量的影响
目的：探讨氧化应激对人卵丘颗粒细胞（cumulus granulosa cells,CGCs）线粒体功能及胚胎质量的影响。
方法：选择2018年11月至2019年5月在解放军第901医院生殖医学中心接受卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injectio，ICSI)助孕且卵巢储备功能正常（normal ovarian Reserve，NOR）的90例患者作为研究对象，收集所有卵母细胞的CGCs，根据取卵后第3天（D3)优质胚胎占比将研究对象为3组:a组（优胚占比＜1/3，n=27），b组（1/3≤优胚占比＜2/3，n=41），c组（优胚占比≥2/3，n=22）。荧光素酶法检测三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）含量，WST-8法检测总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD)活性，硫代巴比妥酸法检测丙二醛（malondialdehyde，MDA)含量，采用spearman秩和分析探讨SOD、MDA与ATP含量间的相关性，并比较各组间SOD、MDA与ATP水平的差异，评估其对胚胎质量的影响。
结果：1.CGCs中ATP含量与总SOD活性呈正相关（r=0.473，P=0.000＜0.05），与MDA含量呈负相关（数r=-0.674，P=0.000＜0.05）。
2.随胚胎质量的升高，ATP含量呈上升趋势，而总SOD活性则呈下降趋势，但三组间ATP、SOD及MDA含量差异均无统计学意义（P>0.05）。
结论：氧化应激可导致CGCs线粒体损伤，ATP含量降低；但与胚胎质量无明显相关性。
第二部分 卵丘颗粒细胞线粒体DNA损伤对胚胎质量的影响
目的：探讨人CGCs线粒体DNA（Mitochondrial DNA，mtDNA）损伤对胚胎质量的影响。
方法：1.选择2019年5月至2019年12月在解放军第901医院生殖医学中心接受ICSI助孕治疗且为NOR的60例患者作为研究对象，取卵日收集所有单个成熟卵母细胞即MⅡ期卵母细胞对应的CGCs，提取CGCs基因组DNA，实时荧光定量聚合酶链锁反应技术(Real-time Quantitative PCR,Q-PCR)检测CGCs的mtDNA相对拷贝数。根据CGCs对应的241枚D3胚胎累积评分（embryo cumulative score，ECS）分为A组（ECS＜10，n=61）、B组（10≤ECS≤30，n=117）和C组（ECS＞30，n=63），分析CGCs的mtDNA拷贝数与胚胎质量的关系。
2.上述60例患者各取一份CGCs DNA溶液，普通PCR扩增后采用Sanger测序技术检测mtDNA D-Loop区突变，按其对应的60枚胚胎ECS评分分组为上A、B、C三组，分析CGCs mtDNA D-Loop区位点突变数与胚胎质量的关系。
结果：1.随胚胎评分的增加mtDNA拷贝数呈递增趋势，其中A组mtDNA拷贝数是C组的0.71±0.33，差异有统计学意义（P＜0.05）。
2.随胚胎评分的增加D-loop区突变数呈递减趋势，A组(4.86±2.23)显著高于B组(3.42±2.10)和C组（3.29±1.33)（P＜0.05）。60例患者共检出D-loop区80个变异位点,总突变数为235个，其中42个为新发现的突变，点突变167个占71.06%，缺失突变40个占17.02%，插入突变28个占11.91%；出现频率≥5次的高变位点10个，分别为nt.175delA、nt.326InA、nt.329G-A、nt.16443T-C、nt.16444C-T、nt.16448T-C、nt.16255G-T、nt.16324T-C、nt.16442C-T、nt.16447InC。HVRⅠ区突变34个，HVRⅡ区突变114个，HVRⅢ区突变4个，周边区突变83个。
结论：CGCs的mtDNA拷贝数减少及D-loop区变异位点增加均对胚胎质量有负面影响。