【摘 要】
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本论文以秦巴山区不同产地红豆杉(Taxus chinensis)为试验材料,采用组织培养法分离纯化得到237株内生真菌,其中,从留坝、南郑、佛坪分别分离得到120株、35株、82株。为了检测
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本论文以秦巴山区不同产地红豆杉(Taxus chinensis)为试验材料,采用组织培养法分离纯化得到237株内生真菌,其中,从留坝、南郑、佛坪分别分离得到120株、35株、82株。为了检测内生真菌是否产紫杉醇,对分离得到的内生真菌进行液体发酵培养,利用UV法、HPLC法、HPLC-MS法分别对其发酵液乙酸乙酯萃取物进行检测。结果表明,有9株内生真菌代谢产紫杉醇,其中佛坪7株,留坝2株。产量最高的菌株为LB-10,含量为846.1μg/L。分离纯化得到产紫杉醇菌株种类及数量的差异可能与宿主的地理环境不同有关。采用传统分类学方法及分子生物学方法对产紫杉醇的9株内生真菌进行分类鉴定,该9株菌分别鉴定为:Tax-4为镰刀菌(Fusarium solani);Tax-12为拟茎点霉属(Phomopsis sp.);Tax-13为曲霉属(Aspergillus sp.);Tax-19为炭角菌属(Xylaria sp.);Tax-21、G8为枝孢属(Cladosporium sp.);Tax-38为角担菌属(Ceratobasidium sp.);G23为链格孢属(Alternaria sp.);LB-10为绿僵菌(Metarhizium anisopliae),9株产紫杉醇内生真菌中半知菌类占75%,为优势菌群。其中紫杉醇产量较高的LB-10绿僵菌(Metarhizium anisopliae),有作为工业化生产紫杉醇生产菌的潜力。
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