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在酵母细胞中信息素信号通路和细胞壁完整性通路是两条重要的MAP激酶信号通路,它们之间具有很重要的交互作用。Afr1p同时受到两条信号通路转录因子Ste12和Rlm1的转录激活。它对两条通路中的信号调节具有极其重要的作用。对Afr1p功能及作用机制的探索将有助于解决相关领域重要的科学问题。本论文主要考察了Afr1p在细胞周期G1/S、G2/M中的功能。通过同源重组将LUE2插入缺失了野生型AFR1基因。将afr1Δ菌株经信息素α因子同步后重新释放到新鲜培养基中,观察发现,其细胞出芽率明显低于野生型细胞,这说明:当afr1Δ菌株从α因子诱导的G1期停滞中恢复时,其生长速度慢于对照菌株。因此,Afr1p有促进细胞从G1期停滞中恢复生长的作用。但是,afr1Δ菌株从营养缺乏的G0周期停滞中重新恢复生长时,与野生型菌株相比,细胞出芽率没有明显差别,说明Afr1p对稳定期G0细胞的恢复生长并无影响。温度敏感突变株406(cdc28 afr1Δ::LEU2)在限制性温度下生长停滞后恢复生长,其细胞出芽率明显低于菌株cdc28-4(cdc28),因此认为,Afr1p有促进细胞从限制温度引起的停滞中恢复生长的作用。在酿酒酵母中通过半乳糖诱导过量表达Afr1p 6小时后,细胞出现了明显的极化生长现象,形成了多核的长芽细胞,该细胞形态与隔膜蛋白Cdc12p温度敏感突变株在限制温度下形成的形态相类似,因此推测,过量表达的Afr1p可能影响了Cdc12p的正常功能,使其不能正确将Hsl1p定位至芽颈并磷酸化Swe1p,从而导致细胞周期停滞在G2/M期,形成长芽。为了证实这一观点,构建了菌株915(HSL1-GFP)。在半乳糖诱导过量表达Afr1p的情况下,无法观察到Hsl1-GFP的荧光信号,而在未诱导的情况下可以正确在芽颈位置观察到Hsl1-GFP的信号。因此,过量表达Afr1p影响Hsl1p在细胞的颈部正确定位。在afr1Δ的菌株916中,能够观察到Hsl1p的荧光定位。afr1Δ并不影响Hsl1p在G2/M期在细胞中的定位。