双阳离子型离子液体和十八烷基修饰的混合模式硅胶固定相的制备及其色谱性能

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高效液相色谱法作为目前广泛应用的分离分析和纯化技术,在生命科学、材料科学、食品科学和环境科学等众多领域中都发挥着不可替代的作用,而液相色谱固定相不仅是色谱分离性能的决定性因素,还是直接影响物质分离效果的重要原因,因此高效液相色谱新型固定相的开发一直是研究热点。近年来,单一分离模式液相色谱技术以其高灵敏度、高选择性和高分离能力等特点得到了快速发展,但是随着样品复杂程度的不断增加,单分离模式色谱技术逐渐暴露出其局限性。近年来出现了混合分离模式色谱技术,其具有选择性可调、分辨率高、载样量大的特点,可以在单根色谱柱上实现多重分离机理,在复杂样品分离分析方面有着很大的潜力,因此开发混合模式色谱固定相已经成为新型固定相研究的重点。离子液体因为具有低熔点、高选择性和低蒸汽压等独特的理化性质及其可设计性强的特点,被广泛应用于混合模式色谱固定相的研究中。本论文采用球形多孔硅胶为固定相基质,以双阳离子型离子液体和十八烷基长链为配基,通过分步键合的方式制备了一种混合模式硅胶固定相并进行了表征和系统的色谱性能评价。本论文主要包括以下研究内容:1.1,5-双(咪唑-1-基)戊烷单体的合成与表征:通过核磁共振波谱仪和液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪对其进行了表征,结果表明1,5-双(咪唑-1-基)戊烷单体合成成功且纯度较高。2.双阳离子型离子液体和十八烷基修饰的混合模式硅胶固定相的制备与表征:通过亲核取代分别将十八烷基长链和1,5-双(咪唑-1-基)戊烷修饰到球形多孔硅胶的表面,并采用1-氯丁烷对离子液体咪唑端进行封端处理,制备了一种以双阳离子型离子液体和长碳链为配基的新型混合模式硅胶色谱固定相。利用傅里叶红外光谱仪对固定相基质上修饰的官能团进行表征,结果说明双阳离子型离子液体和十八烷基成功修饰。用元素分析仪对固定相基质上修饰的官能团进行定性和定量表征,结果表明各阶段配基均成功修饰到固定相基质上,并成功封端。通过物理吸附仪的BET比表面积测试法对活化硅胶以及咪唑基双阳离子型离子液体和十八烷基共同修饰的混合模式硅胶色谱固定相的比表面积进行测定和计算,对键合前后的硅胶比表面积和孔结构的变化进行表征,结果表明随着配基键合量的增加,硅胶的比表面积减少,孔结构被填充。3.将合成的双阳离子型离子液体和十八烷基修饰的混合模式色谱固定相装填成色谱柱,通过改变流动相中的水含量、盐浓度和有机相种类对色谱柱的保留机理进行探究,结果发现在特定条件下,该色谱柱可表现为亲水色谱分离模式(HILIC)、反相色谱分离模式(RPLC)和反相/亲水混合色谱分离模式(RPLC/HILIC)。采用亲水性碱基核苷类化合物评价填料在HILIC模式下的分离性能,采用萘等疏水物质评价填料在RPLC模式下的分离性能,采用包含亲水和疏水等混合极性化合物评价在RPLC/HILIC模式下的分离性能,均取得了优良的分离效果。此外,通过重复性实验验证了色谱柱的分离稳定性和重复性并取得了满意的结果。
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