急性肺损伤（acute lung injury,ALI）是失血性休克最常见的并发症之一,是重症失血性休克患者死亡的主要原因之一。因此,探寻ALI的有效防治措施对于降低重症失血性休克的病死率,具有积极意义。失血性休克肠淋巴液（post-hemorrhagic shock mesenteric lymph,PHSML）参与了ALI的发生与发展,探索针对PHSML的措施同样对于干预失血性休克引起的ALI具有重要意义。研究表明,17β雌二醇（17βestradiol,E2）可减轻失血性休克后的器官损伤,改善肠系膜淋巴管收缩功能与血管反应性,恢复细胞免疫功能。细胞自噬是真核细胞的自我保护机制,主要通过调控蛋白质和多肽循环来维持细胞内环境稳定,但过度自噬可引起细胞损伤。研究显示,过度自噬参与了各种致病因素引起ALI的病理过程以及失血性休克引起ALI的发生过程,且与PHSML介导ALI的作用相关。但是,E2减轻失血性休克后PHSML介导ALI的作用是否通过调控细胞自噬实现的?还不清楚。据此,本研究假设“雌激素通过抑制过度自噬减轻PHSML介导的ALI”。为了验证该假说,本研究应用失血性休克清醒大鼠模型,观察E2对失血性休克后ALI的作用,进一步观察静脉输入PHSML、细胞自噬激动剂雷帕霉素（rapamycin,RAPA）对E2改善失血性休克后ALI作用的影响;最后,应用大鼠肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs）,比较E2处理或未经E2处理的大鼠PHSML对PMVECs增殖活力的影响,进一步明确E2、PHSML以及肺损伤之间的关系。首先,雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（注射等量DMSO,Sham）、休克组（常规方法建立失血性休克模型,注射等量DMSO,Shock）、Sham+E2组、Shock+E2组。Shock与Shock+E2组在液体复苏后引流PHSML 3 h,Sham与Sham+E2组在相应时间点引流肠淋巴液30 min。获取的肠淋巴液分别为PHSML、E2治疗的PHSML（PHSML-E2）、正常肠淋巴液（normal mesenteric lymph,NML）。将这些肠淋巴液冻存于-80℃冰箱,用于后续实验。随后,将雄性Wistar大鼠随机分为Sham组、Sham+E2组、Shock组、Shock+E2组、Shock+E2+RAPA组、Shock+E2+PHSML组,后两组分别在液体复苏时腹腔注射RAPA、静脉输入PHSML。在液体复苏结束后3h或相应时间点,监测大鼠肺功能及肠袢微区血流量变化,随后分别留取肺和肠组织用于组织结构形态观察、含水量检测以及自噬标志蛋白LC3 II/I、p62、Beclin-1表达分析。结果显示:Shock降低了大鼠肺功能,减少了肠血流量,引起了肺、肠组织损伤,增加了肺、肠组织含水量、LC3 II/I及Beclin-1蛋白表达,降低了p62表达;E2治疗显著减轻了Shock大鼠肺、肠损伤,恢复了肺功能与肠血流量,降低了肺、肠组织含水量、LC3 II/I及Beclin-1表达,提高了p62表达;RAPA处理增加了Shock+E2大鼠肺、肠组织LC3 II/I及Beclin-1表达,降低了p62表达,也加重了肺和肠的组织结构损伤、肺功能障碍、肠血流量不足,表明E2的有利作用是通过抑制肺、肠组织中的细胞自噬完成的;静脉输入PHSML后,大鼠肺、肠损伤加重、含水量增加,肺功能障碍明显与肠血流量不足,自噬相关蛋白LC3 II/I及Beclin-1均上调、p62下调,说明PHSML可诱导细胞自噬并抑制了E2对失血性休克后ALI的保护作用。最后,培养大鼠PMVECs,根据处理因素不同,将细胞实验分为:Control组、NML组、PHSML组、PHSML-E2组以及PHSML+E2组,检测细胞活力。结果显示,与Control组相比,PHSML处理后的PMVECs活力明显下降;与PHSML组相比,E2共孵育、PHSML-E2组的细胞活力显著增加;这说明E2处理降低了PHSML损伤大鼠PMVECs的作用。总之,E2处理减轻了失血性休克后肠损伤,进而减轻了PHSML介导的ALI,这些作用是通过抑制细胞自噬实现的。但是,E2作用的详细分子机制还需深入研究。