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目的
探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)对高糖诱导的人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)炎症反应和细胞外基质的影响及a-硫辛酸的干预作用。
方法
传代培养的HMCs同步化后分组:正常糖对照组、高糖组、甘露醇对照组、高糖+a-硫辛酸处理组(a-硫辛酸浓度分别为50、100、200μmol/L),于实验0h、12h、24h、48h、72h收集各组细胞及上清液,采用RT-PCR法和ELISA法检测各组细胞中AMPKmRNA及上清液中AMPK、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、a-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth musele actin,a-SMA)的含量。
结果
1、高糖组人肾小球系膜细胞AMPKmRNA及AMPK蛋白的表达较正常糖对照组明显下降(P＜0.01),MPO、a-SMA蛋白的表达明显增加(P＜0.01)。
2、α-硫辛酸各处理组比高糖组AMPKmRNA及AMPK蛋白表达有明显增加(P＜0.01),MPO、a-SMA蛋白的分泌较处理前明显降低(P＜0.05)。
结论
高糖能够抑制人肾小球系膜细胞中AMPK的表达,诱导MPO(炎症反应指标)、a-SMA(系膜细胞活化从而分泌细胞外基质增多的指标)的表达,抗氧化剂a-硫辛酸可以上调高糖抑制的AMPK的表达,减少高糖刺激下HMCs中MPO、a-SMA蛋白的分泌,为DKD的防治提供新的理论依据。