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一氧化氮作为一种新型的神经递质和信使分子,在中枢神经系统中广泛分布,而且具有非常重要的作用,故而受到越来越多的重视。NO是由一氧化氮合酶催化L-精氨酸产生的。在神经系统,NOS共有3种亚型:即神经型NOS、内皮型NOS和诱导型NOS,其中神经型NOS主要存在于大多数神经元中。本课题采用SABC免疫组织化学方法,首次对各年龄段家兔整个脑内nNOS阳性神经元的形态、结构和分布进行系统研究,为全面揭示兔脑nNOS阳性神经元的生长发育规律,探讨NO在中枢神经系统中的作用和作用机制,为神经系统疾病的研究,尤其是神经病理生理学研究提供形态学依据。
试验一利用SABC免疫组织化学方法,对家兔大脑皮质各叶中的神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的形态、结构、分布及其发育变化进行了系统研究,结果表明:大脑皮质有nNOS免疫阳性神经元和神经纤维出现。nNOS阳性神经元呈棕黄色,细胞核染色浅淡。神经元的形态多样化,胞体呈梭形、三角形、圆形、椭圆形、梨形等多种形状;突起长短、数量不等,nNOS免疫阳性神经纤维呈棕色串珠状且交错分布。随着年龄增长,大脑皮质nNOS阳性神经元的密度、突起数、最长突起长度逐渐减小,而胞体截面积却逐渐增加,这些指标到了老年变化极显著(P<0.01),表明nNOS和NO与神经元的发育和衰老有关。
试验二利用免疫组织化学方法,对家兔小脑皮质nNOS阳性神经元的形态分布及其发育变化进行了研究,结果表明:小脑皮质中也有较丰富的nNOS免疫阳性神经元和神经纤维出现。在浦肯野氏细胞层,阳性神经元排列规整,大多呈单层分布,并有突起伸向分子层。nNOS免疫阳性神经元呈棕黄色,细胞核染色浅淡。阳性神经元的形态多样,胞体呈梭形、三角形、圆形、不规则形等多种形状。
试验三对家兔下丘脑(Hypothalamus)各神经核团中nNOS阳性神经元的形态分布及发育变化进行了研究,结果显示:家兔下丘脑中分布有广泛的nNOS阳性神经元,阳性产物呈棕黄色,均匀分布于阳性神经元的胞质内,细胞核基本不着色。阳性神经元有大、小两种,突起较细,数量少。下丘脑室旁核(PVN)、视上核(SON)内nNOS阳性神经元主要为大型细胞,属于下丘脑大细胞神经分泌系统,参与心血管活动和血压的调节,另外有些核团如弓状核内的nNOS阳性神经元,主要为小型细胞,属于下丘脑小细胞神经分泌系统,表明nNOS和NO在下丘脑神经内分泌调节系统中起重要作用。
试验四对nNOS阳性神经元在家兔脑神经核的形态和分布进行了研究,结果表明:①在大脑的基底核(尾状核、豆状核和屏状核)内有nNOS免疫阳性神经元分布,这些神经元排列密集,主要为小型细胞,呈棕黄色,细胞核淡染;神经元胞体呈圆形、椭圆形、杆状、梭形、梨形等,突起较短,有2~3个。②在脑干的多个神经核团中也有较多的nNOS阳性神经元分布,这些神经元呈棕黄色,细胞核淡染;胞体形态多种多样,突起数目不等,长短也有较大差异;胞体大小在各神经核差异明显,有的神经核神经元较大,为大锥体细胞,如脑桥的三叉神经中脑核、三叉神经脑桥核和三叉神经运动核,有的神经核却为小神经元,如脑桥的前橄榄核、面神经核和脑桥泌涎核,有的为中等神经元,如脑桥核和蓝斑。