本研究通过改变水曲柳外植体细胞内的H₂O₂和NO含量,研究体胚发生过程中H₂O₂和NO对外植体PCD的调控作用、对H₂O₂代谢相关酶类和NO合成相关酶类活性的影响,探讨H₂O₂和NO信号网络中的NO合成途径,以阐述H₂O₂和NO调控水曲柳体胚发生和外植体PCD的机理。主要研究结果如下:（1）H₂O₂和NO作为植物细胞诱发PCD的重要内源调节因子,共同介导了水曲柳体胚发生中外植体PCD的发生,可以作为其体胚发生中外植体细胞PCD的指示性信号。（2）外源H₂O₂和NO调控了水曲柳体胚发生中外植体细胞内源H₂O₂代谢和NO合成,改变了其细胞内H₂O₂代谢相关酶SOD、POD、PPO活性以及NO合成相关酶NOS和NR的活性,进而改变了其细胞内H₂O₂和NO的含量,H₂O₂和NO作为重要的内源信号因子具有协同作用,共同诱发了水曲柳外植体细胞PCD的发生;NO可能位于H₂O₂信号途径的上游,通过调控相关抗氧化酶和NO合成酶活性,调节内源H₂O₂含量,保持水曲柳外植体细胞内NO/H₂O₂的平衡,缓解低氧或高氧胁迫造成的伤害。（3）水曲柳体胚发生中细胞内NO由一氧化氮合酶（NOS）和硝酸还原酶（NR）两种途径共同合成,但二者起主导作用时间节点和对体胚发生的功能各不相同。体胚诱导培养早期阶段,NOS合成途径起主导作用;在体细胞向胚性细胞转化阶段,NR合成途径起主导作用。两种NO抑制剂均抑制了水曲柳体胚的发生,抑制了细胞内NO和H₂O₂的积累,并进一步加剧了外植体的褐化。其中NaN₃处理对NO和H₂O₂的抑制作用强于L-NMMA。Na N₃处理对细胞总死亡量有明显抑制作用,但对PCD比例有促进作用;而L-NMMA处理在体胚诱导初期,对细胞总死亡量和PCD比例均有促进作用。