人淅性抗角蛋白抗体的基因克隆表达及亲和力成熟

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研究者尝试采取基因工程的方法,利用噬菌体抗体库等技术制备具有高特异性和高亲 和力的人源性抗角蛋白抗体.先以筛选所获得克隆的重链与轻链库随机搭配进行轻链替换,对形成的换链库采用解离速率筛选法(off-rate selection)选取亲和力提高的克隆;然后再将获得的轻链基因与重链库基因重组进行重链替换,筛选亲和力进一步提高的克隆,并进行抗体抗原结合活性及特异性检测、亲和力测定和可变区基因序列比较分析.通过筛选获得了4个能与角蛋白特异结合的噬菌体抗体克隆.研究表明,利用基因工程原理和噬菌体抗体库 技术不经免疫免疫而直接制备高质量的人源性单克隆抗体是切实可行的.所获得的高亲和力、高特异性抗角蛋白抗体为今后更加深入和精确地研究抗角蛋白自身抗体的作用打下了基础.
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